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RNAi沉默Smad4基因表达对人前列腺癌细胞增殖的影响
引用本文:吴开杰,张栋,曾津,薛艳,薛玉泉,王蓉,王新阳,贺大林. RNAi沉默Smad4基因表达对人前列腺癌细胞增殖的影响[J]. 第三军医大学学报, 2009, 31(13): 1250-1253
作者姓名:吴开杰  张栋  曾津  薛艳  薛玉泉  王蓉  王新阳  贺大林
作者单位:西安交通大学医学院第一附属医院,泌尿外科,西安,710061;西安交通大学医学院第一附属医院,肿瘤中心,西安,710061;西安交通大学医学院第一附属医院,影像中心,西安,710061
摘    要:目的 观察RNA干扰技术沉默Smad4基因表达对人前列腺癌细胞增殖能力的影响,探讨Smad4在前列腺癌恶性进展中的作用.方法 用半定量RT-PCR和Western blot方法检测LNCaP、PC-3、DU145以及ARCaP亚细胞系IF11、IA8等多种不同前列腺癌细胞Smad4 mRNA及蛋白表达的情况,筛选出Smad4基因阳性表达的细胞;针对Smad4基因不同部位设计并化学合成3对不同的靶向小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),脂质体介导瞬时转染阳性表达Smad4的细胞,转染后48 h分别用RT-PCR和Western blot检测Smad4 mRNA及蛋白表达水平的变化,用MTT法检测沉默Smad4表达对细胞增殖的影响.结果 检测的5种前列腺癌细胞中仅LNCaP、PC-3、DU145 3种细胞表达Smad4 mRNA及蛋白;选择PC-3细胞做siRNA转染,与阴性对照序列组(siRNA-NC)相比,转染48 h后,转染SiRNA1、SiRNA2、SiRNA3的3组PC-3细胞的Smad4 mRNA表达水平均显著下降,但仅有siRNA3组Smad4蛋白表达水平显著降低.转染SiRNA3沉默Smad4基因表达后PC-3细胞的体外增殖能力显著增强(P<0.05).结论 不同前列腺癌细胞Smad4基因的表达存在差异,靶向siRNA下调Smad4的表达可增强前列腺癌细胞的增殖能力.

关 键 词:前列腺癌  肿瘤进展  RNA干扰  Smad4

Effects of Smad4 gene silencing by small interfering RNA on the proliferation of prostate cancer cells in vitro
WU Kai-jie,ZHANG Dong,ZENG Jin,XUE Yan,XUE Yu-quan,WANG Rong,WANG Xin-yang,HE Da-lin. Effects of Smad4 gene silencing by small interfering RNA on the proliferation of prostate cancer cells in vitro[J]. Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae, 2009, 31(13): 1250-1253
Authors:WU Kai-jie  ZHANG Dong  ZENG Jin  XUE Yan  XUE Yu-quan  WANG Rong  WANG Xin-yang  HE Da-lin
Abstract:
Keywords:Smad4
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