| 人黑色素浓集激素1型受体真核表达载体的构建及稳定转染CHO细胞系的建立 |
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| 引用本文： | 袁成福,杨俊霞,魏丽丽,石华,陈济,易发平,马永平,宋方洲. 人黑色素浓集激素1型受体真核表达载体的构建及稳定转染CHO细胞系的建立[J]. 解放军医学杂志, 2007, 32(1): 5-8 |
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| 作者姓名： | 袁成福 杨俊霞 魏丽丽 石华 陈济 易发平 马永平 宋方洲 |
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| 作者单位： | 445000,湖北恩施,湖北民族学院医学院生物化学教研室;重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室;重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室;教育部临床检验诊断学重点实验室 |
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| 摘 要： | 目的 构建人黑色素浓集激素1型受体(MCHR1)真核表达载体,转染CHO细胞,建立稳定转染的CHO细胞系.方法 采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR1基因的全长cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.1( ),经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染CHO细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的CHO细胞系,用RT-PCR、Western blot及免疫荧光法检测MCHR1的表达.结果 成功构建了pcDNA3.1( )/MCHR1真核表达载体,并建立了稳定转染的CHO细胞系,成功地表达了目的基因.结论 真核表达载体的构建和稳定转染CHO细胞系的建立为进一步研究MCHR1功能奠定了良好的实验基础.
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| 关 键 词： | 受体 黑色素浓集激素 1型 真核表达载体 CHO细胞 基因表达 转染 |
| 收稿时间： | 2006-10-17 |
| 修稿时间： | 2006-11-27 |
Construction of eukaryotic expressing vector of human melanin-concentrating hormone receptor 1 and establishment of stable transfectant CHO cell line |
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| Yuan Chengfu, Yang Junxia, Wei Lili,et al.. Construction of eukaryotic expressing vector of human melanin-concentrating hormone receptor 1 and establishment of stable transfectant CHO cell line[J]. Medical Journal of Chinese People's Liberation Army, 2007, 32(1): 5-8 |
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| Authors: | Yuan Chengfu Yang Junxia Wei Lili et al. |
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| Affiliation: | Department of Biochemistry, Medical College of Hubei Institute for Nationalities, Enshi, Hubei 445000, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | receptor, melanin-concentrating hormone, type 1 eukaryotic expression vector CHO cells gene expression transfection |
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