小鼠胚胎干细胞在血管内皮生长因子作用下造血相关基因表达的研究

目的　研究小鼠胚胎干细胞系ES D3在血管内皮生长因子 (VEGF)的作用下表达造血相关基因的情况。方法　先将ES D3形成拟胚体 ,将拟胚体细胞转入含不同浓度VEGF和VEGF 干细胞因子 (SCF)培养基中。分为VEGF 2 0ng/ml组、VEGF 10ng/ml组、VEGF 5ng/ml组、VEGF 5ng/ml SCF组、VEGF 10ng/ml SCF组、VEGF 2 0ng/ml SCF组 ;同时设不加因子的自发分化对照组。采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测各组造血转录因子GATA 2和早期造血细胞阶段表达的基因c kit和 β H1表达 ,并进行定量分析。 结果　经 1周诱导培养 ,各实验组均可检测GATA 2表达 ,其中VEGF 2 0ng/ml组和VEGF SCF组表达较强。未分化胚胎干细胞不表达c kit和 β H1mRNA ,拟胚体细胞开始表达c kit,实验组以VEGF 10ng/ml SCF组和VEGF 2 0ng/ml SCF组表达最强。VEGF 10ng/ml组和VEGF 5ng/ml组 ,β H1的表达分别为阴性和弱阳性 ,其他各组可检测到阳性条带 ,以VEGF 10ng/ml SCF组表达最强 ;而自发分化组未检测到上述mRNA的表达。结论　对造血转录因子和早期造血细胞阶段表达基因的检测可进一步证实胚胎干细胞的成血分化 ,VEGF或VEGF SCF可诱导胚胎干细胞的早期造血分化

The expression of genes associated with hematopoietic differentiation in murine embryonic stem cell induced by vascular endothelial growth factor