| X射线诱导γH2AX焦点形成的定量分析及其致DNA双链断裂的动态变化 |
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| 引用本文： | 董隽,王成涛,张纯,任玉峰,欧阳斌,张天,王振宇,Gloria,C.Li,Fuqiu,He,文碧秀.X射线诱导γH2AX焦点形成的定量分析及其致DNA双链断裂的动态变化[J].中华放射肿瘤学杂志,2018,27(3):303-308. |
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| 作者姓名： | 董隽 王成涛 张纯 任玉峰 欧阳斌 张天 王振宇 Gloria C.Li Fuqiu He 文碧秀 |
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| 作者单位： | 510080 广州,中山大学附属第一医院放射治疗科(董隽、王成涛、任玉峰、欧阳斌、张天、王振宇、文碧秀);523059 东莞市人民医院放射治疗科(张纯);10021 New York,Department of Medical Physics and Radiation Oncology,Memorial Sloan-Kettering Cancer Center (Gloria C.Li、Fuqiu He) |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(81172209、81673088) |
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| 摘 要： | 目的 比较DNA依赖蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs+/+)和DNA-PKcs-/-小鼠胚胎成纤维细胞(MEF) X射线诱导γH2AX焦点形成的定量分析,并对鼻咽癌SUNE-1细胞进行X射线致DNA DSB动态变化。方法 采用蛋白印迹检测DNA-PKcs蛋白表达情况,细胞免疫荧光检测X射线5 Gy诱导的γH2AX焦点形成,通过ImageJ软件分析γH2AX焦点形成数量的差异。结果 DNA-PKcs在DNA-PKcs-/-和DNA-PKcs+/+ MEF细胞中分别表达缺失和正常。应用γH2AX焦点/细胞和γH2AX焦点/mm2分析方法动态分析X射线诱导的DNA-PKcs+/+、DNA-PKcs-/-MEF细胞和SUNE-1细胞DSB形成的总体趋势一致;照后 0.5~1.0 h大量γH2AX焦点形成,DNA-PKcs+/+ MEF细胞于照后6.0 h完成修复,DNA-PKcs-/-MEF和SUNE-1细胞X射线后于照后24.0 h完成修复。γH2AX焦点/细胞的峰值出现在照后1.0 h,γH2AX焦点/mm2的峰值则出现在照后0.5 h。对于DNA-PKcs+/+和DNA-PKcs-/-MEF细胞,γH2AX焦点/细胞在照后0.5、1.0、3.0、6.0、12.0 h的不同,而γH2AX焦点/mm2在照后3.0、6.0、12.0 h不同。结论 利用细胞免疫荧光动态检测照后致γH2AX焦点/细胞或γH2AX焦点/mm2的分析方法为动态定量研究DSB损伤及修复提供了新的思路。
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| 关 键 词： | 非同源末端连接 DNA依赖蛋白激酶催化亚基 γH2AX焦点 SUNE-1细胞系 |
| 收稿时间： | 2017-04-01 |
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