| 老年痴呆噬菌体抗体库的构建及抗Aβ肽单链抗体的筛选 |
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| 引用本文： | 赵振富,苏雪莹,初国良,徐杰,汪华侨,姚志彬.老年痴呆噬菌体抗体库的构建及抗Aβ肽单链抗体的筛选[J].细胞与分子免疫学杂志,2009,25(8). |
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| 作者姓名： | 赵振富 苏雪莹 初国良 徐杰 汪华侨 姚志彬 |
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| 作者单位： | 1. 深圳大学医学院解剖教研室,广东,深圳,518060
2. 佳木斯大学附属第一医院检验科,黑龙江,佳木斯,154002
3. 中山大学中山医学院解剖教研室,广东,广州,510080 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的: 构建人源性的老年痴呆(AD)噬菌体抗体库,筛选1株人源性的β-淀粉样蛋白(Aβ)特异性单链抗体(scFv).方法: 利用噬菌体展示技术,用20个AD患者的外周血B细胞首次构建了AD患者的单链可变区噬菌体抗体库.以Aβ40为靶,挑选出77个阳性抗体克隆,从中筛选出一个抗Aβ scFv-H1,并对其重链和轻链可变区基因进行测序分析.利用预吸附实验及竞争性ELISA测定该抗体对Aβ40的特异性及结合位点. 结果: 成功构建出AD患者的单链可变区噬菌体抗体库,库容量为1.5×106.从库中筛选出1株抗Aβ40的单链噬菌体抗体-H1,DNA测序结果证实了其抗体的基因结构及氨基酸序列.预吸附及竞争性ELISA证实该抗体对Aβ40的结合表位位于蛋白氨基端的1到16个氨基酸内. 结论: 利用噬菌体抗体库技术可成功制备Aβ肽特异性scFv,为AD患者的临床诊断和被动免疫治疗提供了一种新的可供选择的途径.
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| 关 键 词： | 阿尔茨海默病 噬菌体展示抗体库 单链可变区抗体 β淀粉样蛋白 |
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