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| 新型冠状病毒非结构蛋白NSP13通过调控IκBα蛋白降解抑制NF-κB信号通路 | |
| 作者姓名： | 闫聪睿 安华英 马骏 巩家媛 高锋华 宁畅文 张猛 李宝义 苏允琦 魏汉琪 刘鹏宇 蒋兴伟 于群 |
| 作者单位： | 军事科学院军事医学研究院卫生勤务与血液研究所 |
| 摘 要： | 目的 研究新型冠状病毒非结构蛋白13(NSP13)调控NF-κB信号通路的作用机制。方法 利用GV367-NSP13-FLAG慢病毒感染的方法制备高表达NSP13的A549细胞（A549-NSP13）和A549对照组，用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和ELISA检测NF-κB下游细胞因子白细胞介素6(IL-6)和趋化因子5(CCL-5)表达水平；Western印迹法检测NF-κB信号通路P65、磷酸化P65和NF-κB抑制因子α(IκBα)蛋白表达。放线菌酮10 mg·L-1处理细胞0,15,30,45,90和120 min,Western印迹法检测IκBα蛋白半衰期。结果 与A549对照组相比，A549-NSP13细胞检测到FLAG标签蛋白条带，且NSP13 mRNA表达显著上调（P<0.01），表明A549-NSP13细胞系构建成功。与A549对照组相比，A549-NSP13细胞IL-6 mRNA和蛋白表达水平（P<0.01）及CCL-5 mRNA和蛋白表达水平（P<0.05,P<0.01）均显著降低；磷酸化P65蛋白表达下降（P<0.01），而... |
| 关 键 词： | 新型冠状病毒 非结构蛋白13 NF-κB信号通路 NF-κB抑制因子α蛋白 |