核因子κB在低氧诱导因子1α基因修饰神经干细胞上调血管内皮生长因子表达中的桥接作用** |
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引用本文: | 金玉玲,刘静静,朱晓峰.核因子κB在低氧诱导因子1α基因修饰神经干细胞上调血管内皮生长因子表达中的桥接作用**[J].中国神经再生研究,2009,13(49):9668-9672. |
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作者姓名: | 金玉玲 刘静静 朱晓峰 |
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作者单位: | 佳木斯大学附属第一医院神经一科,佳木斯大学附属第一医院,佳木斯大学附属第一医院 |
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基金项目: | 黑龙江省自然基金资助项目(ZJY0508)*; 黑龙江省教育厅基金资助项目(11521297) * |
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摘 要: | 背景:很多研究发现,在脑缺氧损伤区域核因子κB与血管内皮生长因子表达呈正相关。因此,作者大胆假设,核因子κB是否处于低氧诱导因子1α上调血管内皮生长因子作用通路上并起桥接作用。
目的:以低氧诱导因子1α修饰的神经干细胞为载体,观察核因子κB 在低氧诱导因子1α上调血管内皮生长因子表达通路中的作用。
设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-03/12在佳木斯大学神经科学研究所完成。
材料:新生24 h内的Wistar大鼠,雌雄不拘。
方法:扩增腺病毒载体低氧诱导因子1α-绿色荧光蛋白后转染神经干细胞,荧光检测神经干细胞中低氧诱导因子1α-绿色荧光蛋白及空载体Ad-绿色荧光蛋白表达,分别提取基因转染后神经干细胞、空载体转染神经干细胞、正常神经干细胞蛋白。然后低氧诱导因子1α基因修饰的神经干细胞中按50,150,300 μmol/L浓度梯度加入核因子κB特异性抑制剂二硫氨基甲酸酞吡咯烷,Western Blot法检测其中血管内皮生长因子的表达变化。
主要观察指标:各组神经干细胞中低氧诱导因子1α、血管内皮生长因子和核因子κB 的表达;给予梯浓度核因子κB 特异性抑制剂后神经干细胞中血管内皮生长因子的表达。
结果:腺病毒低氧诱导因子1α-绿色荧光蛋白转染神经干细胞后基因表达强弱与MOI及转染时间有关;转染低氧诱导因子1α-绿色荧光蛋白后的神经干细胞中低氧诱导因子1α、血管内皮生长因子和核因子κB的表达呈正相关;给予梯浓度核因子κB 特异性抑制剂后腺病毒低氧诱导因子1α-绿色荧光蛋白修饰的神经干细胞中血管内皮生长因子的表达呈抑制剂浓度依赖性下调,各浓度组之间血管内皮生长因子表达差异有显著性意义(P < 0.05~0.01)。
结论:核因子κB位于低氧诱导因子1α上调血管内皮生长因子表达的信号通路上并起桥接作用。
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关 键 词: | 神经干细胞 低氧诱导因子1α 基因转染 血管内皮生长因子 核因子κB |
Bridging effect of nuclear factor kappa B on upregulation of vascular endothelial growth factor expression in hypoxia-inducible factor-1 alpha gene-modified neural stem cells |
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Institution: | First Department of Neurology,First Affiliated Hospital,Jiamusi University,,First Department of Neurology,First Affiliated Hospital,Jiamusi University,,First Department of Neurology,First Affiliated Hospital,Jiamusi University |
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