束缚应激状态下大鼠腹腔巨噬细胞释放一氧化氮及肿瘤坏死因子α和H2O2的变化

目的：检测牙龈卟啉菌内毒素（Pg-LPS）刺激大鼠腹腔巨噬细胞所释放的NO、肿瘤坏死因子α和H2O2是否受到束缚应激的影响。 方法：实验于2005-09／2006-02在福建医科医科大学口腔医学院和福建中西医结合研究院实验室进行。①分组：取14只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组及应激组，每组7只。②造模：正常组不加刺激，应激组大鼠置于特制的圆柱形筒内，于实验开始最初3d每日9：00～15：00被置于束缚筒6h，3d后于每日9：00至次日9：00被置于束缚筒24h，正常饲养24h后再应激24h，如此循环直至实验结束。③观察指标：观察造模12d后两组大鼠体质量变化，并及时处死，收集腹腔液，计数巨噬细胞总量。贴壁后的巨噬细胞分成2组分别继续用RPMI-1640培养液和RPMI-1640培养液＋1mg／L Pg-LPS继续培养，24h后分别收集上清，观察无刺激组、单纯Pg-LPS组、单纯应激组和应激＋Pg-LPS组上清液中NO，H2O2和肿瘤坏死因子③水平。 结果：14只大鼠全部进入结果分析。①实验完成时应激组大鼠体质量低于正常组（162．14&;#177;17．53），（263．57&;#177;19．94）g，P〈0．05]。②应激组大鼠腹腔巨噬细胞总量低于正常组（9．49&;#177;2．75）&;#215;10^6，（31．47&;#177;8．00）&;#215;10^6，P〈0．01]。③NO浓度：单纯Pg-LPS组显著高于无刺激组（265．69&;#177;10．86），（239．40&;#177;12．07）μmol／L，P〈0．05]；应激＋Pg-LPS组显著高于无刺激组和单纯应激组（257．57&;#177;12．43），（239．40&;#177;12．07），（243．32&;#177;13．94）μmol／L，P〈0．05]。（4）H2O2浓度：单纯应激组和应激＋Pg-LPS组显著高于无刺激组（7．14&;#177;1．04），（7．54&;#177;1．15），（5．27&;#177;1．02）μmol／L，P〈0．05]。⑤肿瘤坏死因子α水平：应激＋Pg-LPS组显著高于无刺激组（16．81&;#177;4．76），（8．38&;#177;0．93）ng／L，P〈0．05]。 结论：①束缚应激可改变巨噬细胞对牙龈卟啉菌内毒素刺激的反应，引起大鼠腹腔巨噬细胞功能紊乱。②应激作为一种不良刺激因素，可以和牙龈卟啉菌内毒素一起发生协同作用，引起炎症反应发生。

Changes in NO releasing, tumor necrosis factor alpha and H2O2 in the peritoneal macrophages of rats under restrained stress