| 结核分支杆菌Ag85B蛋白在大肠杆菌中的高效表达 |
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| 引用本文： | 吴雪琼,张俊仙,郑越,张灵霞.结核分支杆菌Ag85B蛋白在大肠杆菌中的高效表达[J].广东医学,2003,24(5):487-488. |
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| 作者姓名： | 吴雪琼 张俊仙 郑越 张灵霞 |
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| 作者单位： | 中国人民解放军第三○九医院结核病研究室,北京,100091 |
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| 基金项目： | 总后勤部卫生部科研基金资助项目 (编号 :2 0 0 2 - 1 2 ) |
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| 摘 要： | 目的：通过结核分支杆菌Ag85B基因在大肠杆菌中的表达，获得大量纯化的重组Ag85B(rAg85B)蛋白。方法:应用PCR技术扩增结核分支杆菌H37RvAg85B DNA序列；以质粒pET24b为表达载体，构建Ag85B重组质粒，然后转化大肠杆菌BL21(DE3)；以IPTG诱导转化子，通过SDS—PAGE电泳鉴定rAg85B的表达水平，采用Novagen公司生产的His．Bind蛋白纯化试剂盒纯化rAg85B蛋白。结果:重组质粒PET24b—Ag85B测序表明与报道的序列相同；它在大肠杆菌BL21(DE3)细胞内以包涵体形式存在，表达量占菌体总蛋白的30％左右。纯化后的rAg85B样品经SDS—PAGE和光密度扫描分析表明其纯度约为95％左右，每100ml培养菌可获得10mg左右纯化的重组蛋白。结论:pET24b—Ag85B大肠杆菌工程菌株能高效表达rAg85B蛋白，大量纯化的rAg85B为其进一步的研究与应用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 结核分支杆菌 Ag85B蛋白 大肠杆菌 表达 |
| 修稿时间： | 2002年11月11 |
Effectine expression of Ag85B protein of mycobacterium tuberculosis in escherichiacoli |
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