| 含RIZ1 PR结构域融合蛋白的原核表达、提纯与功能分析 |
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| 引用本文： | 余卫平,方娟娟,DONG Wei-feng,GEYER Ron. 含RIZ1 PR结构域融合蛋白的原核表达、提纯与功能分析[J]. 东南大学学报(医学版), 2006, 25(4): 240-243 |
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| 作者姓名： | 余卫平 方娟娟 DONG Wei-feng GEYER Ron |
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| 作者单位： | 东南大学基础医学院,病理学与病理生理学系,江苏,南京,210009;加拿大Saskatchewan大学医学院,癌症研究中心,Saskatchewan Saskatoon,S7N 4H4;东南大学基础医学院,病理学与病理生理学系,江苏,南京,210009;加拿大Saskatchewan大学医学院,癌症研究中心,Saskatchewan Saskatoon,S7N 4H4 |
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| 基金项目： | 加拿大SHRF资助项目 |
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| 摘 要： | 目的：表达与提纯RIZ1第1个至第200个氨基酸含PR结构域的活性GST融合蛋白质（GST-PR200融合蛋白）。方法：设计引物以含人RIZ1 cDNA全序列的pRIZ1 RH质粒为模板克隆获得目的基因片段，测序核对后经EcoRⅠ与XhoⅠ双酶切，以正确阅读框架插入相同酶切的pGEX-6P-3中，经转染与IPrG诱导表达筛选到阳性大肠杆菌克隆并提纯该融合蛋白质。分别采用SDS—PAGE蛋白电泳法、质谱分析法及组蛋白甲基化转移酶（HMT）测定法鉴定其性质与功能。结果：获得的纯化融合蛋白质相对分子质量约为47000，其CPM值明显高于对照组（P〈0．01），且与作用时间呈正相关。结论：所构建的融合蛋白原核表达系统能有效表达活性GST-PR200融合蛋白，可供大量提取作进一步研究。
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| 关 键 词： | RIZ1蛋白 PR结构域 表达载体 组蛋白甲基化作用 |
| 文章编号： | 1671-6264(2006)04-0240-04 |
| 修稿时间： | 2005-10-09 |
Prokaryotic expression, purification and functional analysis of a fusion protein containing PR domain of RIZ1 |
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| YU Wei-ping,FANG Juan-juan,DONG Wei-feng,GEYER Ron. Prokaryotic expression, purification and functional analysis of a fusion protein containing PR domain of RIZ1[J]. Journal of Southeast Univ: Medical Sci Ed, 2006, 25(4): 240-243 |
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| Authors: | YU Wei-ping FANG Juan-juan DONG Wei-feng GEYER Ron |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RIZ1 protein PR domain expression vector histone methylation |
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