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脑心通胶囊对缺糖缺氧损伤脑微血管内皮细胞的保护作用及其机制
引用本文:王海燕,周惠芬,何昱,杨洁红,虞立,李畅,万海同.脑心通胶囊对缺糖缺氧损伤脑微血管内皮细胞的保护作用及其机制[J].中草药,2018,49(14):3318-3325.
作者姓名:王海燕  周惠芬  何昱  杨洁红  虞立  李畅  万海同
作者单位:浙江中医药大学
基金项目:国家自然科学基金资助项目(81630105);浙江省自然科学基金项目(LZ17H270001,LZ18H270001);浙江省卫生高层次创新人才培养工程项目资助
摘    要:目的探讨脑心通胶囊(NXT)对乳鼠缺糖缺氧损伤脑微血管内皮细胞(rBMECs)的体外保护作用及其机制。方法原代培养rBMECs,进行兔抗鼠VⅢ因子鉴定,MTT筛选出NXT肠吸收液体外保护rBMECs的质量浓度范围,优选出3个质量浓度进行实验。实验设对照组、模型组、尼莫地平(200μg/mL)组、不同质量浓度(62.50、125.00、250.00 mg/L)NXT肠吸收液组、NXT肠吸收液(250.00 mg/L)和LY294002(20μmol/L,PI3K/Akt通路抑制剂)共作用组。倒置显微镜下观察rBMECs形态,按照ELISA试剂盒方法检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达水平,Hoechst33342染色荧光显微镜观察细胞凋亡情况,流式细胞仪检测各组rBMECs的早期凋亡率,Western blotting法检测PI3K/Akt信号通路关键蛋白的表达情况。结果与模型组相比,NXT不同质量浓度给药组均能显著改善rBMECs的形态,降低细胞上清液中LDH、MMP-9的量,显著降低rBMECs的凋亡数和早期凋亡率,可显著抑制PI3K/Akt通路中p-Akt、Bcl-2的表达上调及Bax的表达下降,抑制Caspase-3活性。PI3K/Akt信号通路的特异性抑制剂LY294002的加入,阻断了该通路信号的传导,显著降低了NXT的保护作用。结论 NXT对缺糖缺氧致rBMECs损伤具有抗凋亡保护作用,其作用机制与PI3K/Akt信号通路有关。

关 键 词:脑心通胶囊  脑微血管内皮细胞  缺糖缺氧损伤  凋亡  PI3K/Akt
收稿时间:2017/12/11 0:00:00

Protective effects and mechanism of Naoxintong Capsules on rat brain microvascular endothelial cells (rBMECs) induced by oxygen-glucose deprivation
WANG Hai-yan,ZHOU Hui-fen,HE Yu,YANG Jie-hong,YU Li,LI Chang and WAN Hai-tong.Protective effects and mechanism of Naoxintong Capsules on rat brain microvascular endothelial cells (rBMECs) induced by oxygen-glucose deprivation[J].Chinese Traditional and Herbal Drugs,2018,49(14):3318-3325.
Authors:WANG Hai-yan  ZHOU Hui-fen  HE Yu  YANG Jie-hong  YU Li  LI Chang and WAN Hai-tong
Institution:Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou 310053, China,Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou 310053, China,Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou 310053, China,Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou 310053, China,Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou 310053, China,Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou 310053, China and Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou 310053, China
Abstract:
Keywords:Naoxintong Capsules  rat brain microvascular endothelial cells  oxygen-glucose deprivation  apoptosis  PI3K/Akt
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