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盐酸小檗碱通过PI3K/Akt信号通路促进小鼠前成骨细胞MC3T3-E1的分化
引用本文:江健,廖莉娅,容婵,陈捷侨,Ashish SHRESTHA,刘星琦,苏雅,舒晓春. 盐酸小檗碱通过PI3K/Akt信号通路促进小鼠前成骨细胞MC3T3-E1的分化[J]. 中国病理生理杂志, 2018, 34(10): 1869-1875. DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2018.10.021
作者姓名:江健  廖莉娅  容婵  陈捷侨  Ashish SHRESTHA  刘星琦  苏雅  舒晓春
作者单位:1. 中山大学附属第五医院, 广东 珠海 519000;
2. 南方医科大学附属顺德医院, 广东 佛山 528300
基金项目:珠海市医疗卫生科技计划项目(No.20161027E030033)
摘    要:目的:研究盐酸小檗碱对小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1分化与矿化的调控作用及其机制。方法:MC3T3-E1细胞给予不同浓度(0、1、5、10和20 mg/L)的盐酸小檗碱刺激3 d,CCK-8法检测细胞活性。不同浓度的盐酸小檗碱分别干预3 d和7 d,检测细胞碱性磷酸酶(ALP)活性。进一步将实验随机分为4组:对照组、盐酸小檗碱组、盐酸小檗碱+LY249002(PI3K/Akt通路抑制剂)组及LY249002组。干预2 d后,采用real-time PCR检测成骨细胞分化相关因子ALP、骨钙素(OCN)、骨桥蛋白(OPN)及Runt相关转录因子2(Runx2)的mRNA表达情况,采用Western blot检测PI3K/Akt信号通路相关蛋白p-Akt的表达水平。将MC3TC-E1细胞用矿化培养基诱导21 d,茜素红染色检测其矿化情况。结果:与对照组相比,不同浓度的盐酸小檗碱对细胞活性的影响没有明显差异;不同浓度的盐酸小檗碱处理MC3T3-E1细胞后ALP活性有不同程度升高。Real-time PCR结果表明,盐酸小檗碱(5 mg/L)促进ALP、OCN、OPN及Runx2的mRNA表达(P 0. 01),而LY294002能抑制这些分化相关因子的表达。Western blot检测结果表明,盐酸小檗碱(5 mg/L)促进p-Akt蛋白的表达(P 0. 01),其作用被LY249002抑制。茜素红染色发现盐酸小檗碱组矿化明显,但LY294002能抑制盐酸小檗碱的促进作用。结论:盐酸小檗碱可以促进小鼠前成骨细胞的分化与矿化,其机制可能与其激活PI3K/Akt信号通路有关。

关 键 词:盐酸小檗碱  骨质疏松症  成骨细胞分化  PI3K/Akt信号通路  矿化  
收稿时间:2018-08-14

Berberine hydrochloride promotes differentiation of mouse preosteoblast MC3T3-E1 cells through PI3K/Akt signaling pathway
JIANG Jian,LIAO Li-ya,RONG Chan,CHEN Jie-qiao,Ashish SHRESTHA,LIU Xing-qi,SU Ya,SHU Xiao-chun. Berberine hydrochloride promotes differentiation of mouse preosteoblast MC3T3-E1 cells through PI3K/Akt signaling pathway[J]. Chinese Journal of Pathophysiology, 2018, 34(10): 1869-1875. DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2018.10.021
Authors:JIANG Jian  LIAO Li-ya  RONG Chan  CHEN Jie-qiao  Ashish SHRESTHA  LIU Xing-qi  SU Ya  SHU Xiao-chun
Affiliation:1. The Fifth Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University, Zhuhai 519000, China;
2. Shunde Hospital Affiliated to Southern Medical University, Foshan 528330, China
Abstract:
Keywords:Berberine hydrochloride  Osteoporosis  Osteoblast differentiation  PI3K/Akt signaling pathway  Mineralization
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