| 血细胞分离机大量采集实验猕猴外周血单核细胞方法探讨 |
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| 引用本文： | 孙晓梅,曹春渝,高家红,黄璋琼,陆彩霞,陈瑜,陈洁,代解杰.血细胞分离机大量采集实验猕猴外周血单核细胞方法探讨[J].实验动物与比较医学,2008(6). |
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| 作者姓名： | 孙晓梅 曹春渝 高家红 黄璋琼 陆彩霞 陈瑜 陈洁 代解杰 |
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| 作者单位： | 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所;宝日医生物技术北京有限公司;金宝肾护理产品上海有限公司; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金
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| 摘 要： | 目的 使用COBE Spectra血液成分分离机大量采集实验猕猴外周血单核细胞(PBMCs),继而可从中分离得到外周血造血干细胞(PBSC),为进一步利用猕猴开展免疫学研究、基因治疗提供足够的目的 细胞,探讨采集的关键技术,建立安全、有效的采集方法.方法 体重为4-5奴的实验猕猴5只,采集前一个月内分3次进行自体或异体血液于4℃储备共120 mL,用于采集时填充管路.5只猴采集前接受rhGM-CSF 20μg/ks皮下注射动员4～5 d,麻醉动物后行股动脉穿刺,选择自动外周血干细胞收集程序(Auto-PBSC)进行采集.采集结束后管路中血液以10 mL/min回输给动物3～5 min.结果 生长因子连续注射第4天外周血白细胞数增至最高,收获细胞数量随循环血量和采集次数增加而增多.经动员的所有猴能够采集到需要的PBMC,最多达9.9×108,采集次数1～3次,循环血量达750～1420 mL,实验结束后1只猕猴因心脏衰竭死亡.结论 人用血细胞分离机可用于4～5 kg实验猕猴PBMC的大量采集.由于动物不同于人体,为保证采集成功需要选用适合于猕猴的程序,采集前做好储血和生长因子动员准备,稳定的麻醉保定,提高抗凝剂比例,积极处理并发症是关键.
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| 关 键 词： | 实验猕猴 外周血单核细胞 造血干细胞 采集 |
Collection of Large Quantity of PBMCs of Laboratory Rhesus Macaque by Blood Separator |
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| SUN Xiao-mei,Cao Chun-yu,GAO Jia-hong,HUANG Zhang-qiong,LU Cai-xi,CHENG Yu,CHENG Jie,DAI Jiejie.Collection of Large Quantity of PBMCs of Laboratory Rhesus Macaque by Blood Separator[J].Laboratory Animal and Comparative Medicine,2008(6). |
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| Authors: | SUN Xiao-mei Cao Chun-yu GAO Jia-hong HUANG Zhang-qiong LU Cai-xi CHENG Yu CHENG Jie DAI Jiejie |
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| Institution: | SUN Xiao-mei~1,Cao Chun-yu~2,GAO Jia-hong~1,HUANG Zhang-qiong~1,LU Cai-xia~1,CHENG Yu~1,CHENG Jie~3,DAI Jiejie~1(1.Institute of Medical Biology,Chinese Academy of Medical Science , Peking Union Medical College,Kunming 650118,China,2.TaKaRa Biomedical Technology Beijing Co.,Ltd,Beijing 102206,3.Cambro Medical Sales Shanghai Co.Ltd,Chengdu 610072) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Laboratory rhesus macaque Peripheral blood mononuclear cells PBMCs Peripheral blood stem cells PBSC Collection |
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