染氟小鼠成骨细胞系MC3T3-E1细胞中还原型谷胱甘肽和氧化型谷胱甘肽观察

目的 观察染氟小鼠成骨细胞系MC3T3-E1细胞中还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)的水平.方法 采用噻唑蓝(MTT)法检测不同染氟条件下F-剂量分别为0(对照)、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、12.0、20.0 mg/L]MC3T3-E1细胞1、2、4、10 d的细胞活性.另外,按染氟剂量,将MC3T3-E1细胞分为0(对照)、2、8、20 mg/L组,分别染氟2、4、10 d,采用高效液相色谱—串联四极杆质谱技术检测细胞内GSH、GSSG和谷氨酰胺(Gln)水平.结果 染氟1d时2.0 mg/L组细胞活性(0.57±0.05)明显高于对照组(0.49±0.03,P＜0.01)；染氟4d时8.0、12.0 mg/L组细胞活性(0.49±0.07、0.47±0.09)明显低于对照组(0.63±0.06,P＜ 0.05或＜ 0.01)；染氟10d时8.0 mg/L组细胞活性(1.52±0.29)明显高于对照组(0.86±0.23),而20.0 mg/L组细胞活性(0,54±0.07)明显低于对照组(P均＜0.01).染氟2、10d时20 mg/L组细胞中GSH水平(13.92±4.63)、(0.53±0.30) μmol/L]明显低于相应的对照组(26.42±3.67)、(24.85±5.68)μmol/L,P均＜0.01].染氟2d时2 mg/L组、染氟4d时8 mg/L组、染氟10 d时8 mg/L组细胞内GSSG水平(1.12±0.62)、(2.13±0.62)、(2.97±1.30)μmol/L]明显高于相应的对照组(0.55±0.22)、(1.46±0.46)、(1.35±0.50)μmol/L,P＜ 0.05或＜ 0.01].染氟4d时2 mg/L组和染氟10d时8、20 mg/L组细胞内Gln水平(62.80±17.41)、(122.26±19.51)、(19.38±8.11) μmol/L]明显低于相应的对照组(83.28±14.32)、(147.15±16.95) rmol/L,P均＜0.05或＜ 0.01].结论 染氟能明显改变成骨细胞内的GSH、GSSG和Gln水平,从而影响细胞内氧化还原平衡态.

Level of reduced glutathione and oxidized glutathione in a mouse bone cell line MC3T3-E1 cells exposed to fluoride