P21^Cip/WAF1及P27^Kip1与增殖细胞核抗原在人骨髓间充质干细胞向肝细胞分化过程中的表达木术

背景：P21^cip/WAF1, P27^Kip1 是两种重要的细胞周期的负调控因子，增殖细胞核抗原是反映干细胞增殖的指标。目的：观察体外诱导人骨髓间充质干细胞向肝细胞分化过程中P21^cip/WAF1, P27^Kip1及增殖细胞核抗原的表达变化。设计、时间及地点：细胞学基因水平观察，于2006-12／2007-06在中山大学附属第二医院林百欣医学研究中心实验室完成。材料：骨髓来源于中山大学附属第二医院行骨髓穿刺的健康供者。方法：全骨髓贴壁筛选法体外分离培养人骨髓间充质干细胞，传至第5代后，加入含20ug／L肝细胞生长因子、10μg／L成纤维细胞生长因子4的opti-MEM1低血清培养基向肝细胞诱导分化。主要观察指标：诱导后RT-PCR检测细胞内P21^cip/WAF1, P27^Kip1及增殖细胞核抗原基因mRNA的表达。结果：骨醢间充质干细胞向肝细胞定向诱导后0，1，3，5，7d，细胞内P21^cip/WAF1, mRNA表达的相对量逐渐升高（P〈0．01），1, P27^Kip1mRNA表达的相对量无明显差异（P〉0．05），增殖细胞核抗原mRNA表达的相对量除诱导后0，1d无明显差异（P〉0．05）外，其余各时间点均逐渐降低（P〈0．01）。结论：P21^CipANAF1高表达抑制了骨髓间充质干细胞增殖，同时在其向肝细胞分化过程中起一定调控作用，P27Kip1可能并不起作用，增殖细胞核抗原的表达则与P21CipWAF1相反，呈逐步减少趋势。