天然可降解脱钙骨基质材料复合脂肪干细胞的三维培养

背景：脱钙骨基质是一种常用的组织工程支架材料，脂肪干细胞是近年来发现的一种成体干细胞，二者均可自体取材，二者复合培养的研究还未见报道。目的：观察脂肪干细胞与脱钙骨基质复合后三维培养的生长、增殖情况。方法：无菌切取兔腹股沟皮下脂肪垫，采用Ⅰ型胶原酶搅拌消化法分离培养原代脂肪干细胞，系列传代传至第3代，倒置显微镜下观察细胞形态及生长情况，免疫荧光细胞化学染色检测细胞表面抗原的表达。切取兔髂骨，制备脱钙骨基质。取第3代脂肪干细胞，与脱钙骨基质复合后共培养，1周后扫描电镜观察细胞黏附和生长情况，2周后石蜡包埋切片进行苏木精-伊红染色。结果与结论：自兔皮下脂肪分离培养获得的脂肪干细胞增殖迅速，第3代脂肪干细胞表面抗原CD44呈阳性表达，CD34为阴性；制备的脱钙骨基质为三维立体多孔结构，具有良好的可塑性，并有一定的机械强度。复合培养后电镜扫描、苏木精-伊红染色显示，细胞在脱钙骨基质表面和孔隙内黏附生长良好，并能继续增殖和分泌胞外基质。结果提示脂肪干细胞与脱钙骨基质复合共培养生长增殖良好，并能分泌细胞外基质。关键词：脱钙骨基质；脂肪源性干细胞；组织工程；培养；生物材料doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.12.004

Three-dimensional culture of adipose-derived stem cells combined with demineralized bone matrix scaffolds