| AFP基因特异性miRNA表达质粒的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 张玉玲,栾英姿,苏占涛,郑燕,郏雁飞,汪运山. AFP基因特异性miRNA表达质粒的构建及鉴定[J]. 山东医药, 2008, 48(11): 33-35 |
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| 作者姓名： | 张玉玲 栾英姿 苏占涛 郑燕 郏雁飞 汪运山 |
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| 作者单位： | 山东省医学科学院基础医学研究所,山东济南250062;济南市中心医院;济南市中心医院 |
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| 摘 要： | 目的 构建针对人甲胎蛋白(AFP)基因的miRNA表达质粒,为进一步研究AFP基因功能奠定基础.方法 沿mRNA序列寻找连续两个AA及后面的19个核苷酸,通过同源性比较,选择与其他任何基因无同源性的序列即作为潜在的miRNA靶位点,针对AFP基因的编码序列体外合成两段互补的寡核苷酸,与线性化的pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR RNAi EXPRESSION VECTOR载体连接后转化大肠杆菌,扩增、纯化获得所需质粒,以琼脂糖凝胶电泳、PCR及基因测序鉴定其相对分子质量及插入片段的序列.结果 纯化质粒的相对分子质量为5.8 kb,PCR鉴定结果符合目的 条带(260 bp左右)大小,插人的寡核苷酸序列与设计的序列完全相符.结论 成功构建了针对人AFP基因的miRRA表达质粒.
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| 关 键 词： | 质粒 甲胎蛋白 基因 表达 |
| 文章编号： | 1002-266X(2008)11-0033-03 |
| 修稿时间： | 2008-01-07 |
Construction and identification of a plasmid expressing miRNA in mammalian cells aimed at AFP gene |
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| ZHANG YU-ling,LUAN Ying-zi,SU Zhan-tao,ZHENG Yan,JIA Yan-fei,WANG Yun-shan. Construction and identification of a plasmid expressing miRNA in mammalian cells aimed at AFP gene[J]. Shandong Medical Journal, 2008, 48(11): 33-35 |
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| Authors: | ZHANG YU-ling LUAN Ying-zi SU Zhan-tao ZHENG Yan JIA Yan-fei WANG Yun-shan |
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