| 泛素特异性蛋白酶4对脂肪干细胞成骨分化的影响 |
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| 引用本文： | 卢跃峰,孙睿男,王丽娜,范震.泛素特异性蛋白酶4对脂肪干细胞成骨分化的影响[J].口腔颌面外科杂志,2019,29(2):69-76. |
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| 作者姓名： | 卢跃峰 孙睿男 王丽娜 范震 |
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| 作者单位： | 上海牙组织修复与再生工程技术中心,同济大学口腔医学院·同济大学附属口腔医院口腔种植科,上海 200072;上海牙组织修复与再生工程技术中心,同济大学口腔医学院·同济大学附属口腔医院口腔种植科,上海 200072;上海牙组织修复与再生工程技术中心,同济大学口腔医学院·同济大学附属口腔医院口腔种植科,上海 200072;上海牙组织修复与再生工程技术中心,同济大学口腔医学院·同济大学附属口腔医院口腔种植科,上海 200072 |
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| 摘 要： | 目的:本研究通过使用泛素特异性蛋白酶4(USP4)抑制剂Vialinin A干预大鼠脂肪干细胞(ASCs)的生长分化,探究USP4对ASCs的成骨分化的影响。方法:将分离培养至第3代的ASCs细胞分为6组分别用含0、0.1、0.5、1、5、10μmol/L Vialinin A的培养基培养10 d,CCK-8检测各组细胞增殖情况。将第3代细胞分为实验组、阳性以及阴性对照组,分别用含0.5μmol/L Vialinin A的成骨诱导液、不含Vialinin A的成骨诱导液及普通的α-MEM培养。检测各组第7天细胞内USP4、β-catenin、碱性磷酸酶(ALP)及骨桥蛋白(OPN)基因的表达。将3组细胞培养至第4、7、10、14天进行ALP染色,检测ALP的活性;培养至21 d时进行茜素红染色,检测细胞矿化结节的形成。采用t检验比较组间数据差异,P<0.05时差异具有统计学意义。结果:0.5μmol/L Vialinin A处理的实验组细胞增殖趋势与对照组的差异无统计学意义,表明该浓度的Vialinin A对细胞增殖无影响,作为后续实验组浓度。ALP与茜素红染色结果显示实验组染色效果均较其他组显著。RT-qPCR结果显示与阴性对照组相比,阳性对照组与实验组细胞内USP4与β-catenin表达量较低,差异具有统计学意义。实验组与阳性对照组相比无显著性差异。与阳性对照组相比,实验组的ALP与OPN表达量显著升高,差异具有统计学意义。结论 :0.5μmol/L的USP4抑制剂Vialinin A可以促进大鼠ASCs内ALP与OPN基因的表达。但USP4可能并非通过β-catenin途径调节其成骨分化。
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| 关 键 词： | 脂肪干细胞 泛素特异性蛋白酶4(USP4) Vialinin A β-catenin 成骨分化 |
Effect of Ubiquitin-specific Protease 4 on Osteogenic Differentiation of Adipose-derived Stem Cells |
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