用ELISA评价鸡源大肠杆菌分离株的致病性

采用1日龄鸡气管上皮细胞包被ELISA板，用大肠杆菌单因子血清建立了辣根过氧化物酶标记葡萄球菌蛋白A（PPA）-粘附ELISA，用以评价鸡源大肠肝菌分离株的致病性。试验最佳条件为：用pH7．4的0．01mol／LPBS包被鸡气管上皮细胞（浓度为1010个细胞／L）；用营养肉汤（NB）稀释鸡源大肠杆菌分离菌株至1012CFU／L，与鸡气管上皮细胞于37℃粘附30min；血清1：50，稀释液中NaCI的浓度为0．15mol／L．判定标准：以NB为阴性对照，P／N≥3．5，分离株对1日龄鸡具有高致病性；3．5＞P／N≥2．25为中度致病性；P／N＜2．25为弱致病性或非致病性菌株。试验表明，本法具有良好的特异性和重复性，与动物实验比较，结果是平行的，且具有简单、快速、准确等特点，可替代动物试验。