| pcDNA3.1(+)/VEGF165质粒转染骨髓内皮祖细胞后VEGF165的表达 |
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| 引用本文： | 杨钰兴,肖明朝,苟欣,邱明. pcDNA3.1(+)/VEGF165质粒转染骨髓内皮祖细胞后VEGF165的表达[J]. 重庆医科大学学报, 2010, 35(5) |
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| 作者姓名： | 杨钰兴 肖明朝 苟欣 邱明 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学附属第一医院泌尿外科,重庆,400016;重庆医科大学附属第一医院泌尿外科,重庆,400016;重庆医科大学附属第一医院泌尿外科,重庆,400016;重庆医科大学附属第一医院泌尿外科,重庆,400016 |
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| 基金项目： | 重庆市自然科学基金计划项目 |
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| 摘 要： | 目的:培养和鉴定大鼠内皮祖细胞(Endothelial progenitor cells,EPCs),观察pcDNA3.1(+)/VEGF165质粒转染大鼠骨髓内皮祖细胞后内皮细胞生长因子165(Vascular endot-helial growth fator-165,VEGF165)的表达.方法:体外培养内皮祖细胞,以免疫细胞化学法检测其表面抗原(CD34、CD133、KDR)的表达.通过pcDNA3.1(+)质粒转染VEGF165后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测内皮祖细胞培养上清液中VEGF蛋白的水平,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测内皮祖细胞中VEGF165mRNA的表达.结果:免疫细胞化学检测表明培养的细胞为大鼠内皮祖细胞,PCR后凝胶电泳显示pcDNA3.1(+)/VEGF165质粒转染组在576 bp处可见有明显条带,pcDNA3.1(+)空质粒转染组和未转染组可见微弱的电泳带位于500 bp与600 bp之间,约576bp大小.ELISA检测结果为pcDNA3.1(+)/VEGF165质粒转染组上清液中VEGF165水平为(175.8±10.7)pg/ml,pcDNA3.1(+)空质粒组为(10.5±1.6)pg/ml,未转染组为(9.3±1.3)pg/ml.结论:内皮祖细胞体外培养有微量VEGF165表达,应用pcDNA3.1(+)/VEGF165载体转染,可使SD大鼠内皮祖细胞高效表达VEGF165.
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| 关 键 词： | 血管内皮生长因子 内皮祖细胞 转染 |
Expression of vascular endothelial growth factor-165 in endothelial progenitor cells transfected with pcDNA3.1(+)NEGF165 plasmid |
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