| 小鼠肝枯否细胞的分离、培养与鉴定 |
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| 引用本文： | 孙晓东 周志伟 万德森 王国强 方淯清 卢震海 陈功. 小鼠肝枯否细胞的分离、培养与鉴定[J]. 中国现代医生, 2007, 45(6X): 22-23,10,F0003 |
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| 作者姓名： | 孙晓东 周志伟 万德森 王国强 方淯清 卢震海 陈功 |
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| 作者单位： | [1]华南肿瘤学国家重点实验室 [2]中山大学肿瘤防治中心腹科,广州510060 |
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| 基金项目： | 2006年度广东省自然科学基金资助面上项目.项目编号：06021355 |
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| 摘 要： | 目的研究BALB／c鼠肝枯否细胞分离、培养和鉴定。方法选用健康雌性8—10w龄鼠，麻醉无菌取肝，D—Hank’s液注射冲洗去血并剪去部分结缔组织，剪碎肝组织，加入链霉蛋白酶E和Ⅰ型胶原酶，水浴振荡消化，再加入DNase Ⅰ，共同消化。不锈钢筛网滤过，用0．005％DNase Ⅰ的1640液清洗细胞液，加Tris—NH4CL溶解红细胞。50％-70％Percoll梯度离心，用含10％FCS的RPMI-1640贴壁培养4—6h洗去非贴壁细胞。通过吞噬墨水实验鉴定枯否细胞。结果枯否细胞的数量为（1．07±0．87）×10^7／g，贴壁率40．3％，用0．4％台盼蓝染色鉴定，细胞存活率在95％以上，吞噬实验发现90％的贴壁细胞具有吞噬功能，即KC的纯度可达90％。贴壁的枯否细胞的形态多样，已经完全伸出了伪足并且伸展贴壁，呈多边形、多角形或者梭形等不规则形状，并且胞浆内可见吞噬的微粒状物质。结论酶消化水浴振荡法结合梯度离心和贴壁培养是分离BALB／c鼠枯否细胞的可靠方法，为进一步实验打下了基础。
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| 关 键 词： | 枯否细胞 分离 培养 鉴定 |
| 文章编号： | 1673-9701（2007）06-22-03 |
| 修稿时间： | 2007-05-30 |
The Seperation ,Cultivation and Identification of Mouse Kupffer Cell |
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| SUN Xiaodong, ZHOU Zhiwei, WAN Desen, WANG Guoqiang, FANG Yujing, LU Zhenhai, CHEN Gong. The Seperation ,Cultivation and Identification of Mouse Kupffer Cell[J]. , 2007, 45(6X): 22-23,10,F0003 |
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| Authors: | SUN Xiaodong ZHOU Zhiwei WAN Desen WANG Guoqiang FANG Yujing LU Zhenhai CHEN Gong |
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| Affiliation: | 1. State Key Laboratory of Oncology in South China; 2. Department of Abdominal surgery, Cancer Center, Sun Yat-sen University, Gu, angzhou, Guangdong, 510060 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Kupffer Cell Seperation Cultivation Identification |
| 本文献已被 CNKI 维普 等数据库收录！ |
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