| HSV_1-TK转染人肺腺癌细胞A549的实验研究 |
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| 引用本文： | 何祥梁!广州,郭先健,钱桂生,何雪花!广州,黄桂君,陈维中,李淑萍.HSV_1-TK转染人肺腺癌细胞A549的实验研究[J].中国肺癌杂志,2001(1). |
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| 作者姓名： | 何祥梁!广州 郭先健 钱桂生 何雪花!广州 黄桂君 陈维中 李淑萍 |
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| 作者单位： | 第一军医大学珠江医院呼吸科(何祥梁!510282广州，何雪花!510282广州)，第三军医大学新桥医院呼吸疾病研究所(郭先健，钱桂生，黄桂君，陈维中，李淑萍) |
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| 摘 要： | 目的 体内外观察HSV1 TK/GCV对人肺腺癌细胞A5 49的杀伤效应。方法 构建含TK基因的逆转录病毒表达载体 ,电穿孔法转化肺癌细胞A5 49。MTT法检测转染细胞对GCV的药物敏感性 ,并观察旁观者效应 ;电镜、FCM、TUNEL法检测GCV诱导转染细胞凋亡变化 ;PCR和细胞原位杂交分别检测转染细胞TK基因整合和表达 ;活体内观察GCV对转染细胞、亲代细胞接种裸鼠皮下肿瘤治疗效果。结果 转基因细胞变得较不规则 ,多角型 ,易形成空泡。A5 49、A5 49 PLXSN、A5 49 TK三种细胞体外倍增时间分别为 ( 3 6.15± 3 .2 7)、( 4 0 .82± 3 .75 )和 ( 4 2 .0 6± 4.12 )小时 (P >0 .0 5 )。转染细胞对GCV的敏感性比亲代细胞提高 46倍 (P<0 .0 0 1)。旁观者效应在高细胞密度接种 ( 1× 10 4细胞 /孔 )较低细胞密度接种 ( 1× 10 3细胞 /孔 )明显。电镜发现转染细胞有凋亡小体、核呈半月征。FCM、TUNEL均能检测到转染细胞凋亡发生率明显高于对照细胞 (P<0 .0 0 1)。PCR及原位杂交表明转染细胞有TK基因整合和表达。体内实验表明GCV能明显抑制转染细胞接种的肿瘤 ,而亲代细胞接种的肿瘤未受抑制。结论 转TK基因细胞在体内外都获得了对GCV的敏感性。TK/GCV系统杀灭肿瘤可能与诱导细胞凋亡有关。GCV能在活体内抑制转TK基因细胞裸鼠移
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| 关 键 词： | HSV_1-TK基因 基因转移 基因治疗 肺肿瘤 细胞凋亡 |
Experimental study on human pulmonary adenocarcinoma cell A549 transfected with HSV_1-TK gene in vitro and in vivo |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | HSV 1 TK gene Gene transfer Gene therapy Lung neoplasms Cell apoptosis |
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