| 金葡菌野生株SEB基因的亚克隆及其原核表达 |
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| 引用本文： | 高世同,张仁利,刘会娟,秦莉,耿艺介,黄达娜,吴少庭.金葡菌野生株SEB基因的亚克隆及其原核表达[J].中国病原生物学杂志,2007,2(6):413-416. |
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| 作者姓名： | 高世同 张仁利 刘会娟 秦莉 耿艺介 黄达娜 吴少庭 |
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| 作者单位： | 1. 深圳市疾病预防控制中心,广东深圳,518020
2. 中山大学医学院达安基因诊断中心,广东广州,510089 |
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| 基金项目： | 深圳市医学重点实验室基金;广东省深圳市科技计划 |
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| 摘 要： | 目的亚克隆金葡菌野生株S407030肠毒素B(SEB)基因,并在大肠埃希菌(E.coli)中表达,以获得重组SEB(rSEB)蛋白。方法将含有SEB基因的质粒pMD-18T/SEB双酶切获得目的片段,插入表达载体pGEX-4T-2中构建重组子pGEX-4T-2/SEB,并转化E.coliJM109感受态菌,阳性克隆以双酶切和PCR法鉴定;含重组质粒的工程菌以IPTG诱导表达rSEB蛋白;表达产物进行SDS-PAGE分析,并采用B-PER GST融合蛋白试剂盒纯化重组rSEB,West-ern blot鉴定其免疫反应性。结果重组质粒经双酶切和PCR扩增鉴定均获得约705 bp的基因片段,与预期结果相一致;诱导表达的含GST的融合重组rSEB蛋白分子质量单位约为53 ku,纯化后作SDS-PAGE电泳显示一条蛋白带,Western blot显示rSEB能够被兔抗SEB抗体识别。结论金葡菌野生株SEB在大肠埃希氏菌中得到有效表达,并获得电泳级纯度的重组rSEB,重组蛋白具有一定的免疫活性,为进一步研究其生物毒性与开发诊断试剂提供了生物材料。
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| 关 键 词： | 金黄色葡萄球菌 肠毒素B 克隆和表达 |
| 文章编号： | 1673-5234（2007）06-0413-04 |
| 收稿时间： | 2007-02-25 |
| 修稿时间： | 2007-06-23 |
Sub-cloning of the enterotoxin B gene from a wild Staphylococcus aureus strain and its expression in Escherichia coli |
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| GAO Shi-tong,ZHANG Ren-li,LIU Hui-juan,QIN Li,GENG Yi-jie,HUANG Da-na,WU Shao-ting.Sub-cloning of the enterotoxin B gene from a wild Staphylococcus aureus strain and its expression in Escherichia coli[J].Journal of Pathogen Biology,2007,2(6):413-416. |
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| Authors: | GAO Shi-tong ZHANG Ren-li LIU Hui-juan QIN Li GENG Yi-jie HUANG Da-na WU Shao-ting |
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| Institution: | 1. Shenzhen Center for Disease Control and Prevention, Shenzhen 518020, China;2. Daan Gene Diagnostic Center of Sun Yat-Sen University, Guangzhou 510089, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Staphylococcus aureus enterotoxin B cloning and expression |
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