针刺足三里和关元穴对衰老小鼠睾丸组织抗氧化作用和超微结构的影响

目的:通过对衰老小鼠足三里和关元穴进行针刺,观察针刺对睾丸抗氧化功能的影响。方法:实验于2003-06/08在黑龙江中医药大学实验中心(省级重点实验室)完成。①实验动物:选用雄性清洁级昆明种小鼠50只,其中青年组40只,2月龄,老年组10只,20～24月龄。将青年小鼠数字表法随机分为4组,空白组、模型组、生理盐水组、针刺组,每组10只。设10只老年小鼠为老年对照组。各组小鼠常规喂养1周后,模型组:每天颈背部皮注射5g/LD-半乳糖0.5mL/只,持续6周。针刺组:每天颈背部皮注射5g/LD-半乳糖0.5mL/只,每天清晨手持小鼠,使其处于仰卧位,用0.5寸长毫针(1cm),在小鼠的关元穴进针3～5mm,双侧足三里穴进针5～7mm,采用补法,留针15min,持续6周。生理盐水组:每天颈背部皮下注射0.5mL生理盐水/只,持续6周。②空白组和老年对照组再常规喂养6周。③针刺结束24h后脱颈椎处死小鼠,取出睾丸组织,按照由南京建成生物工程研究所提供的相应试剂盒操作,通过测量各样品吸光度(A值)计算小鼠睾丸一氧化氮,一氧化氮合酶,超氧化物歧化酶,过氧化氢酶,过氧化脂质,丙二醛各项指标含量。结果:昆明种青年小鼠40只和老年小鼠10只均进入结果分析。①干预42d后,各组小鼠睾丸组织中一氧化氮,一氧化氮合酶,超氧化物歧化酶,过氧化氢酶活性比较:模型组、老年对照组明显低于空白组、生理盐水组、针刺组(P<0.01);针刺组与空白组、生理盐水组比较差异无显著性意义(P>0.05)。②干预42d后,过氧化脂质、丙二醛含量比较:模型组和老年对照组相比差异无显著性意义(P>0.05);针刺组明显低于模型组、老年对照组(P<0.01);模型组、老年对照组明显高于针刺组、空白组、生理盐水组(P<0.01)。③干预42d后睾丸超微结构电镜结果:模型组支持细胞间隙增宽,核周隙增大,并且出现细胞内外水肿的现象。老年对照组中出现支持细胞连接消失,细胞水肿的现象。空白组小鼠的支持细胞的缝隙连接紧密。生理盐水组和空白组、针刺组之间未见差别。结论:针刺足三里和关元穴能提高致衰小鼠睾丸组织中一氧化氮、一氧化氮合酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶的活性,降低过氧化脂质、丙二醛的含量;并能明显改善小鼠睾丸组织的超微结构,从而延缓睾丸的衰老进程。

Influence of acupuncture at Zusanli and Guanyuan on antioxidation and ultrastructure of testicle tissue in aged mice