生物钟基因Bmal1通过氧化应激信号通路调节胰岛茁细胞凋亡的研究

目的探讨生物钟基因brainandmuscleArnt-likeprotein-1（Bmal1）对胰岛β细胞凋亡的调节作用。方法实验分为正常对照组（含5.5mmol/L葡萄糖，NC组）、高糖组（含33.3mmol/L葡萄糖）、正常糖浓度+无关RNA转染组（含5.5mmol/L葡萄糖，NC+siRNA组）、正常糖浓度+Bmal1基因沉默组（NC+Bmal1-/-组）、高糖+无关RNA转染组（含33.3mmol/L葡萄糖，高糖+siRNA组）、高糖+Bmal1基因沉默组（高糖+Bmal1-/-组）。NC组不加干预因素。采用RNA干扰技术沉默大鼠胰岛茁细胞瘤株（INS-1）Bmal1基因，应用TUNEL法检测细胞凋亡，流式细胞仪检测活性氧（ROS）含量，ATP检测试剂盒测定三磷酸腺苷（ATP）含量，实时荧光定量PCR检测Bmal1、去乙酰化酶sirtuin1（Sirt1）mRNA表达情况。结果与NC+siRNA组比较，NC+Bmal1-/-组ATP含量下降，ROS水平增加，Sirt1mRNA表达下降（均P＜0.01）。与NC组比较，高糖组ATP下降，ROS增加，Sirt1mRNA表达下降（均P＜0.01），细胞凋亡增加（P＜0.05）。与高糖+siRNA组比较，高糖+Bmal1-/-组ATP下降，ROS增加，细胞凋亡增加（均P＜0.01），Sirt1mRNA表达有下降趋势，但无统计学差异（P＞0.05）。结论Bmal1可通过调节氧化应激信号通路影响胰岛茁细胞功能和凋亡。