RNA干扰靶向抑制磷脂酰肌醇3-激酶P85α蛋白表达对结直肠癌细胞周期和细胞凋亡的影响

目的探讨RNA干扰靶向抑制磷脂酰肌醇3-激酶（P13K）P85α蛋白表达对结直肠癌细胞周期与细胞凋亡的影响。方法设计4条shRNA干扰载体及1条阴性对照载体．分别稳定转染结直肠癌SW480细胞。采用Western blot筛选出对P13K P85α蛋白抑制效率最高的shRNA干扰片段．然后通过PI标记法和Annexin V—FITC标记法分别检测干扰后SW480细胞周期和细胞凋亡情况。结果转染shRNA／324后．SW480细胞P13K P85α蛋白降低最为显著．抑制率为90％。选择该干扰片段进行后续实验。干扰组与对照组SW480细胞的G1期细胞数量分别占（62．4±2．7）％和（51．2±3．5）％；S期细胞数量占（23．9±1．7）％和（34．1±3．4）％；氟尿嘧啶所诱导的细胞凋亡率为（11．1±3．7）％和（1．4±0．6）％；上述差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论P13K P85α蛋白表达下降可引起结直肠癌SW480细胞周期阻滞，细胞凋亡增加：PI3K P85α可能成为结直肠癌基因治疗的新靶点。