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miR-451对胶质瘤LN229细胞YWHAE表达的影响
引用本文:王乐,南阳,杜依然,康春生,钟跃. miR-451对胶质瘤LN229细胞YWHAE表达的影响[J]. 山东医药, 2013, 53(8): 1-4
作者姓名:王乐  南阳  杜依然  康春生  钟跃
作者单位:天津医科大学总医院,天津,300052
摘    要:目的观察micro RNA-451(miR-451)对胶质瘤LN229细胞YWHAE表达的影响,旨在验证YWHAE基因为miR-451的直接作用靶点。方法将细胞分为miR-451转染组、无义序列组、对照组,分别加入5 pmol miR-451mimics、无义序列、PBS与5μL Lipofectamine 2000混匀20 min,继续培养48 h。将细胞分6组,A组只转染突变型pEZX-MT01-YWHAE-3’-UTR质粒,B组共转染突变型pEZX-MT01-YWHAE-3’-UTR质粒与无义序列,C组共转染突变型pEZX-MT01-YWHAE-3’-UTR质粒与miR-451 mimics,D组只转染野生型pEZX-MT01-YWHAE-3’-UTR,E组共转染野生型pEZX-MT01-YWHAE-3’-UTR与无义序列,F组共转染野生型pEZX-MT01-YWHAE-3’-UTR与miR-451mimics,均与5μL Lipofectamine 2000混匀20 min,继续培养48 h。实时定量PCR法检测细胞miR-451、YWHAE基因表达,Western blot法检测YWHAE蛋白表达。结果对照组、无义序列组、miR-451转染组LN229细胞miR-451基因相对表达量分别为1、1.045、98.534。A~F组荧光素酶相对活性分别为5.042±0.177、5.588±0.684、4.980±0.268、5.265±0.692、5.370±0.443、3.272±0.351,F组与其他各组两两比较,P均<0.01。miR-451转染组细胞YWHAE蛋白相对表达量为0.283±0.081,较对照组(1.612±0.113)、无义序列组(1.833±0.195)明显降低(P均<0.01)。对照组、无义序列组、miR-451转染组LN229细胞YWHAE基因相对表达量分别为1、0.941、0.618。结论miR-451可以明显抑制YWHAE基因的表达,YWHAE是miR-451的直接作用靶点。

关 键 词:YWHAE基因  miR-451  LN229细胞  胶质瘤

Experimental study of YWHAE as a miR-451 direct target gene
WANG Le , NAN Yang , DU Yi-ran , KANG Chun-sheng , ZHONG Yue. Experimental study of YWHAE as a miR-451 direct target gene[J]. Shandong Medical Journal, 2013, 53(8): 1-4
Authors:WANG Le    NAN Yang    DU Yi-ran    KANG Chun-sheng    ZHONG Yue
Affiliation:(Tianjin Medical University General Hospital,Tianjin 300052,P.R.China)
Abstract:
Keywords:
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