细胞工程技术对中华眼镜蛇神经毒素蛋白表达的研究

目的:建立转染中华眼镜蛇神经毒素基因(nt)的中国仓鼠卵巢细胞株,并研究中华眼镜蛇神经毒素(NT)的表达情况。方法:将携带有nt的重组质粒pCDNA3.1(+)/nt转导入中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中,通过药物G418筛选,利用RT-PCR和Western Blotting法对NT的表达进行检测。结果:nt基因成功转导入CHO细胞中,并能顺利表达。结果:RT-PCR和Western Blotting显示nt基因在mRNA水平和蛋白水平有表达;空载体转染的细胞未检测到NT。结论:中华眼镜蛇神经毒素基因成功地转染到CHO细胞中,且能持续大量表达,为中药蛋白在哺乳动物细胞中的表达进行了有益的尝试,为基因治疗技术提供了批量的转基因细胞。