| 人体β-防御素-3突变基因的构建及在大肠埃希菌中的融合表达 |
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| 引用本文： | 魏葆珺,韩跃武.人体β-防御素-3突变基因的构建及在大肠埃希菌中的融合表达[J].中国抗生素杂志,2006,31(11):650-653. |
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| 作者姓名： | 魏葆珺 韩跃武 |
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| 作者单位： | 兰州大学基础医学院,兰州,730000 |
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| 摘 要： | 目的从人正常皮肤组织中提取β-防御索-3基因进行定点突变后在E．coli中融合表达。方法从人正常皮肤组织中提取总RNA，经RT-PCR扩增得到编码β-防御素-3成熟肽的cDNA序列，测序正确后，寻找合适的突变位点，设计含突变位点的引物，用PCR重叠延伸法对β-防御素-3成熟肽cDNA序列进行定点突变，将突变产物克隆至pUC18进行序列测定及在E．coli中融合表达。结果测序结果表明，经RT—PCR所得的β-防御素-3成熟肽序列与GeneBank中报道的编码人β-防御索-3成熟肽的cDNA序列完全-致。经过突变β-防御素-3成熟肽第29位谷氨酰胺密码子由CAG突变为精氨酸密码子CGA，其余核苷酸序列均未发生变化。将突变β-防御素-3基因在E．coli中诱导表达3～5h后可见突变β-防御素-3蛋白表达。结论成功构建并表达了β-防御素-3突变体基因，为进-步对突变体进行真核表达、生物活性研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 人体β-防御素-3 定点突变 基因克隆 测序 基因表达 |
| 文章编号： | 1001-8689(2006)11-0650-04 |
| 收稿时间： | 2005-04-19 |
| 修稿时间： | 2005年4月19日 |
Construction and expression of a site-directed mutant gene of human beta-defensin-3 |
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| Wei Bao-jun,Han Yue-wu.Construction and expression of a site-directed mutant gene of human beta-defensin-3[J].Chinese Journal of Antibiotics,2006,31(11):650-653. |
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| Authors: | Wei Bao-jun Han Yue-wu |
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| Institution: | Basic Medical College of Lanzhou Unversity, Lanzhou 730000 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Human beta-defensin-3 Site-directed mutagensis Gene cloning Sequencing Gene expression |
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