| 非小细胞肺癌T7噬菌体展示文库的构建 |
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| 引用本文： | 岳文涛,王子彤,王钥,张丽娜.非小细胞肺癌T7噬菌体展示文库的构建[J].中国肺癌杂志,2008,11(5). |
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| 作者姓名： | 岳文涛 王子彤 王钥 张丽娜 |
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| 作者单位： | 1. 北京市结核病胸部肿瘤研究所,细胞生物学研究室,北京,101146
2. 北京市结核病胸部肿瘤研究所,细胞生物学研究室,胸外科,北京,101146 |
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| 基金项目： | 北京市科技新星计划项目，北京市优秀人才培养基金，Beijing Novel Program，Returned Overseas Chines;State Education Ministry，北京市人才培养基金 |
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| 摘 要： | 背景与目的SEREX(Serological analysis of recombinant expression libraries)是近年来发展起来的一种寻找肿瘤相关抗原的方法,通过与噬菌体展示技术结合,可以有效和快速的筛选肿瘤相关抗原。本研究拟构建人肺鳞癌和肺腺癌T7噬菌体展示cDNA文库,为进一步筛选和鉴定非小细胞肺癌相关抗原打下基础。方法诊断明确的肺鳞癌和腺癌患者手术标本各5例,Trizol试剂提取总RNA,Straight A's系统分离鳞癌和腺癌mRNA,逆转录合成双链cDNA后,与T7Select 10-3载体连接,体外包装并扩增得到人肺鳞癌和腺癌T7噬菌体展示cDNA文库。结果构建肺鳞癌和肺腺癌T7噬菌体展示cDNA文库各一个,原始文库重组克隆数分别为鳞癌1.8×106pfu,腺癌5×106pfu。扩增后滴度为3.2×1010pfu/mL和2.5×1010pfu/mL。随机从2个文库中各抽取24个克隆PCR扩增插入片断,电泳结果显示肺腺癌文库所有克隆均有插入片段,肺鳞癌文库插入率超过95%(23/24)。两个文库插入片断大小均在(300-1500)bp之间。结论成功构建了人肺鳞癌和腺癌T7噬菌体展示cDNA文库,为下一步筛选和鉴定非小细胞肺癌相关基因奠定基础。
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| 关 键 词： | 噬菌体展示 cDNA文库 肺肿瘤 SEREX |
Construction of a T7 Human Lung Cancer cDNA Library |
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| YUE Wentao,WANG Zitong,WANG Yue,ZHANG Lina.Construction of a T7 Human Lung Cancer cDNA Library[J].Chinese Journal of Lung Cancer,2008,11(5). |
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| Authors: | YUE Wentao WANG Zitong WANG Yue ZHANG Lina |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Phage display cDNA library Lung neoplasms SEREX |
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