| 小鼠 miR-214真核表达载体的构建及其鉴定 |
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| 引用本文： | 施冰,;Les ;Elzenaar,;Ralph ;van ;Oort,;Yigal ;Pinto.小鼠 miR-214真核表达载体的构建及其鉴定[J].中国临床保健杂志,2013(6). |
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| 作者姓名： | 施冰 ;Les ;Elzenaar ;Ralph ;van ;Oort ;Yigal ;Pinto |
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| 作者单位： | [1]北京军区总医院干部病房一科,北京,100700; [2]Heart Failure Research Center,University of Amsterdam |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的：构建小鼠 miR-214的 pcDNA3．1（＋/-）真核表达载体并在 COS -7细胞中转染检测其表达。方法小鼠基因组 DNA 扩增得到 miR -214序列，将酶切后的 miR -214克隆到真核表达载体pcDNA3．1（＋/-），重组 pcDNA3．1（＋/-）-miR-214经过酶切和测序鉴定后转染 COS-7细胞并应用萤光定量 PCR 法检测 miR-214表达水平。结果小鼠 miR-214真核表达载体序列分析完全正确；转染 COS-7细胞后miR-214的表达水平可增加1．41倍。结论成功构建了 pcDNA3．1（＋/-）-miR-214真核表达载体并能在真核细胞中进行表达，为进一步进行 miR-214的功能研究提供了实验基础。
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| 关 键 词： | 微RNAs 遗传载体 真核细胞 COS细胞 小鼠 |
Construction and identification of pcDNA3.1 (+/-)-miR-214 recombinant vector in COS-7 cells |
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| Institution: | SHI Bing[1] Les Elzenaar[2] Ralph van Oort[2] Yigal Pinto[2] |
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