| Beclinl基因沉默对胰腺癌MiaPaCa-2细胞生长的影响 |
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| 作者姓名： | 李晓姝 郭晓钟 王华 肖凤君 李宏宇 任丽楠 |
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| 作者单位： | [1]沈阳军区总医院消化科,沈阳110083 [2]沈阳市第四人民医院消化科 ,沈阳110083 [3]军事医学科学院放射与辐射研究所,沈阳110083 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（81071982）;辽宁省自然科学基金（201102238） |
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| 摘 要： | Beclin1基因与酵母自噬基因Atg 6同源,是参与哺乳动物自噬体形成,调控细胞自噬过程的重要基因.Beclin1自噬基因的缺陷可能导致肿瘤细胞逃避自噬性死亡[1],而稳定转染Beclin1后可促进细胞的自噬活性,并降低了其成瘤能力[2].本研究观察沉默胰腺癌MiaPaCa-2细胞的Beclin1基因表达后对其增殖、凋亡及细胞周期分布的影响,为胰腺癌的基因治疗提供新的思路. 一、材料与方法 1.靶向Beclin1的siRNA表达载体构建：根据siRNA设计原理,由上海吉玛制药技术有限公司构建3个插入靶向Beclin1基因的siRNA（Beclin1-siRNA）质粒以及阴性对照siRNA（NC-siRNA）质粒和荧光标记的siRNA（FAM-siRNA）质粒.经筛选后选择沉默效果最好的Beclin1-siRNA序列插入表达载体U6/Neo,构建表达载体U6/Neo-shBeclin1,同时构建阴性对照载体pGPU6/Neo-shNC及荧光对照载体pGPU6/GFP/Neo-shNC.
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| 关 键 词： | MiaPaCa-2 基因沉默 细胞生长 胰腺癌 Beclin1 表达载体构建 自噬性死亡 siRNA |
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