抗双链DNA酶免疫法测乙型肝炎病毒DNA的评价

血清HBV DNA的检测是乙型肝炎的诊断和疗效观察的重要手段。已有许多方法可直接检测HBV DNA。作者等为了提高灵敏度,开发了一种新的酶联免疫技术来检测PCR扩增产物,称作PCR-DNA的酶免疫测定(DEIA)。此法应用抗双链DNA单克隆抗体的DNA-DNA杂交检测。将单抗预包被在酶联板上。扩增产物经95℃10分钟变性后立即在冰上冷却,加20μl于酶联板孔内,温育50±2℃1小时。洗涤后再加抗双链DNA液温育37℃1小时,洗涤后加过氧化物酶标记的抗抗体,经TMB显色。作者等将PCR-DEIA与斑点印迹杂交(dot blot未经PCR复制)及PCR产物的溴乙淀染色(PCR-EB)和斑点印迹(PCR-dot blot)进行比较。共研究了208份血清标本,其中73份是常规标本,135份是慢性肝炎患者的标本,部分是α-干扰素治疗期。对于乙肝抗原阳性的常规标本,dot blot检出率为70.4％,PCR-EB为74.1％,PCR-DEIA和PCR-dot blot为