| 原癌基因蛋白18第38位丝氨酸点突变肝癌细胞系的建立 |
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| 引用本文： | 李娟,龚舒,刘陆阳,陶忠桦,王琼,甘淋.原癌基因蛋白18第38位丝氨酸点突变肝癌细胞系的建立[J].转化医学杂志,2013,2(2):67-69. |
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| 作者姓名： | 李娟 龚舒 刘陆阳 陶忠桦 王琼 甘淋 |
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| 作者单位： | 泸州医学院医学基础研究中心;泸州医学院医学基础研究中心;国家中医药管理局中医师资格认证中心;泸州医学院医学基础研究中心;泸州医学院医学基础研究中心;国家中医药管理局中医师资格认证中心;泸州医学院医学基础研究中心 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（81001655）；四川省教育厅课题（11ZB125）；泸州医学院课题（2011 122） |
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| 摘 要： | 目的构建人原癌基因蛋白18(oncoproteins 18,Op18)丝氨酸(serine,Ser)38磷酸化位点点突变(S38A)的肝癌细胞系。方法通过重叠延伸聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)的方法定点诱变Op18 S38A,测序鉴定突变结果。采用脂质体转染和抗生素筛选,建立Op18野生型(wild types,wt)和Op18S38A的肝癌细胞株HCCLM6;并用Western blot进行鉴定。结果定点突变构建Op18 S38A的重组质粒经测序证实Op18第38位核苷酸突变由丝氨酸变为丙氨酸。将Op18 wt和Op18 S38A转染肝癌细胞株HCCLM6,抗生素压力筛选建立稳定表达的肝癌细胞株,Western blot结果显示Op18第38位丝氨酸磷酸化(pS38)在Op18 S38A细胞中的表达较Op18 wt和对照组细胞明显下降(P<0.05)。结论建立了稳定表达Op18 S38A的肝癌细胞株,为研究Op18位点磷酸化在肝癌发病中的分子机制提供细胞模型。
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| 关 键 词： | 原癌基因蛋白18 定点突变 磷酸化 肝癌 |
| 收稿时间： | 2012/12/24 0:00:00 |
Construction of oncoprotein 18 serine 38 site directed mutagenesis hepatocellular carcinoma cells |
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| Authors: | LI Juan GONG Shu LIU Lu yang TAO Zhong hu WANG Qiong and GAN Lin |
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| Institution: | Research Center for Preclinical Medicine, Luzhou Medical College;Research Center for Preclinical Medicine, Luzhou Medical College;Accreditation Center of Traditional Chinese Medical Physician,
State Administration of Traditional Chinese Medicine;Research Center for Preclinical Medicine, Luzhou Medical College;Research Center for Preclinical Medicine, Luzhou Medical College;Accreditation Center of Traditional Chinese Medical Physician,
State Administration of Traditional Chinese Medicine;Research Center for Preclinical Medicine, Luzhou Medical College |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Oncoprotein 18 Site directed mutagenesis Phosphorylation Hepatocellular carcinoma cell |
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