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HBV adr亚型体外感染肝细胞模型的建立
引用本文:冷向锋,张秋.HBV adr亚型体外感染肝细胞模型的建立[J].中国病理生理杂志,2010,26(1):200-202.
作者姓名:冷向锋  张秋
作者单位:1青岛大学医学院附属医院, 山东 青岛 266003; 2山东大学药学院, 山东 济南 250012
基金项目:山东大学基金资助项目  
摘    要:目的:构建1.1倍乙型肝炎病毒(HBV)全基因的真核表达载体,稳定转染L-02细胞,建立HBVadr亚型体外感染的细胞模型。方法:以pVUⅡ酶切质粒p3.6Ⅱ获得1.1倍HBV DNA片段,用牛小肠碱性磷酸酶将经EcoRV线性化的pcDNA3去磷酸化,以T4DNA连接酶连接1.1倍HBV DNA片段和线性化的pcDNA3,将构建的pcDNA3-1.1HBV以脂质体转染L-02肝癌细胞,经G418稳定筛选。ELISA检测转染细胞培养上清中HB-sAg、HBeAg的表达。RT-PCR检测转染细胞中HBpreS2、HBX的表达。结果:成功构建了1.1倍HBV全基因真核表达载体,稳定转染L-02后,建立了新的肝细胞系L-02.1Z,其培养上清中可检测到HBsAg、HBeAg的稳定表达,并可检测到HBpreS2、HBX RNA在转染细胞中表达。结论:该表达载体可介导病毒复制,其稳定转染的细胞可作为一种新型的HBV体外感染模型。

关 键 词:肝炎病毒  乙型  表达载体  真核细胞  
收稿时间:2008-12-24
修稿时间:2009-3-24

Establishment of hepatocyte model infected with HBV adr subtype
LENG Xiang-feng,ZHANG Qiu.Establishment of hepatocyte model infected with HBV adr subtype[J].Chinese Journal of Pathophysiology,2010,26(1):200-202.
Authors:LENG Xiang-feng  ZHANG Qiu
Abstract:
Keywords:Hepatitis B virus  Expression vector  Eukaryotic cells
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