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幽门螺杆菌重组中性粒细胞激活蛋白蛋黄抗体的制备
引用本文:邓颖,杨致邦,黄伟,林珊珊,黄进,叶翠莲.幽门螺杆菌重组中性粒细胞激活蛋白蛋黄抗体的制备[J].世界华人消化杂志,2007,15(5):471-475.
作者姓名:邓颖  杨致邦  黄伟  林珊珊  黄进  叶翠莲
作者单位:重庆医科大学微生物学与免疫学教研究室,重庆市,400016;西南大学蚕学与生物技术学院生物技术系,重庆市,402460
摘    要:目的:制备高效价的.抗Nap蛋黄抗体(IgY).方法:大量诱导、培养重组菌pQE30-NapA-DH5α获得重组蛋白Nap,经Ni2 -NTA树脂纯化后,Bradford法测定蛋白浓度.用纯化的Nap蛋白免疫鸡,水稀释结合氯仿有机沉淀法提取IgY.ELISA法测定抗体产生的时间-效价变化.将效价高的Nap-IgY用硫酸铵沉淀法纯化浓缩,间接ELISA法检测效价,Bradford法测定蛋白含量.Western blot检测制备的Nap-IgY的抗体活性.结果:Nap重组蛋白主要以包涵体形式表达,蛋白含量为0.37 g/L.免疫鸡的蛋黄提取物可与Nap发生特异性反应,IgY效价随免疫时间增加而升高,在110 d达最高效价.经纯化浓缩后,Nap-IgY的效价为1:12800,蛋白浓度为23.67 g/L.结论:成功制备了高浓度、高效价的Nap特异性IgY.

关 键 词:幽门螺杆菌  重组蛋白  中性粒细胞激活蛋白  蛋黄抗体
收稿时间:2006-01-09
修稿时间:2006年1月9日

Preparation of egg yolk immunoglobulin against recombinant neutrophil activating protein in Helicobacter pylori
Ying Deng,Zhi-Bang Yang,Wei Huang,Shan-Shan Lin,Jin Huang,Cui-Lian Ye.Preparation of egg yolk immunoglobulin against recombinant neutrophil activating protein in Helicobacter pylori[J].World Chinese Journal of Digestology,2007,15(5):471-475.
Authors:Ying Deng  Zhi-Bang Yang  Wei Huang  Shan-Shan Lin  Jin Huang  Cui-Lian Ye
Abstract:
Keywords:Helicobacter pylori  Recombinant pro-tein  Neutrophil activating protein  Egg yolk immu-noglubin
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