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hTERT|CEA及CMV启动子在人结肠癌细胞株中的转录活性比较
引用本文:贺赛|孙学军|郑见宝|陈南征|任燕飞|Rajendra Gurung|魏光兵|张立|姚建峰|尉春艳. hTERT|CEA及CMV启动子在人结肠癌细胞株中的转录活性比较[J]. 中国普通外科杂志, 2014, 23(1): 74-80
作者姓名:贺赛|孙学军|郑见宝|陈南征|任燕飞|Rajendra Gurung|魏光兵|张立|姚建峰|尉春艳
作者单位:(西安交通大学医学院第一附属医院 普通外科|陕西 西安 710061)
基金项目:

国家自然科学基金资助项目(81172362;81101874);陕西省科学技术研究发展计划资助项目 (2011-K12-19);西安交通大学医学院第一附属医院科研基金资助项目(2009YK03);光华医学创新研究基金资助 项目(0203126)。

摘    要:

目的:比较人端粒酶催化亚单位(hTERT),癌胚抗原(CEA)及巨细胞病毒(CMV)启动子在人结肠癌细胞株LoVo和SW480中的转录活性。 方法:设计引物应用PCR法从人结肠癌基因组中克隆hTERT和CEA启动子;用双酶切和PCR法切除原始载体pLVX-EGFP-3FLAG中的CMV启动子后,将hTERT,CEA启动子与该载体重组,构建出重组质粒pLVX-hTERTp-EGFP-3FLAG和pLVX-CEAp-EGFP-3FLAG;将上述两种质粒及原始载体(含CMV启动子)分别瞬时转染人结肠癌细胞株LoVo和SW480后,检测两种细胞株绿色荧光蛋白表达。 结果:经PCR,酶切及测序鉴定,克隆及载体构建完全正确。CMV,hTERT及CEA启动子的转录活性(绿色荧光细胞数/总细胞数)在LoVo细胞中依次为54.7%,33.0%,9.5%;在SW480中依次为16.5%,10.1%,8.5%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。 结论:在人结肠癌细胞株中,转录活性以CMV启动子最高,hTERT启动子次之,CEA启动子最低。该结果可为结肠癌的靶向性基因治疗研究提供参考。



关 键 词:

结肠肿瘤;转录启动子;转染

收稿时间:2012-12-15
修稿时间:2013-09-07

Comparison of the transcriptional activity of hTERT, CEA and CMV promoter in human colon carcinoma cell lines
HE Sai,SUN Xuejun,ZHENG Jianbao,CHEN Nanzheng,REN Yanfei,RAJENDRA Gurung,W. Comparison of the transcriptional activity of hTERT, CEA and CMV promoter in human colon carcinoma cell lines[J]. Chinese Journal of General Surgery, 2014, 23(1): 74-80
Authors:HE Sai  SUN Xuejun  ZHENG Jianbao  CHEN Nanzheng  REN Yanfei  RAJENDRA Gurung  W
Affiliation:(Department of General Surgery, First Affiliated Hospital, Medical College, Xi''an Jiaotong University, Xi''an China 710061)
Abstract:
Keywords:
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