hTERT|CEA及CMV启动子在人结肠癌细胞株中的转录活性比较

目的：比较人端粒酶催化亚单位（hTERT），癌胚抗原（CEA）及巨细胞病毒（CMV）启动子在人结肠癌细胞株LoVo和SW480中的转录活性。 方法：设计引物应用PCR法从人结肠癌基因组中克隆hTERT和CEA启动子；用双酶切和PCR法切除原始载体pLVX-EGFP-3FLAG中的CMV启动子后，将hTERT，CEA启动子与该载体重组，构建出重组质粒pLVX-hTERTp-EGFP-3FLAG和pLVX-CEAp-EGFP-3FLAG；将上述两种质粒及原始载体（含CMV启动子）分别瞬时转染人结肠癌细胞株LoVo和SW480后，检测两种细胞株绿色荧光蛋白表达。 结果：经PCR，酶切及测序鉴定，克隆及载体构建完全正确。CMV，hTERT及CEA启动子的转录活性（绿色荧光细胞数/总细胞数）在LoVo细胞中依次为54.7%，33.0%，9.5%；在SW480中依次为16.5%，10.1%，8.5%，差异均有统计学意义（均P<0.05）。 结论：在人结肠癌细胞株中，转录活性以CMV启动子最高，hTERT启动子次之，CEA启动子最低。该结果可为结肠癌的靶向性基因治疗研究提供参考。