b型流感嗜血杆菌多糖竞争ELISA检测方法的建立

目的 建立竞争酶联免疫吸附分析法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA),测定b型流感嗜血杆菌多糖(PRP)浓度方法以b型流感嗜血杆菌多糖-酪胺(Ty)为包被抗原,待测多糖为竞争抗原,与优化的抗b型流感嗜血杆菌多糖抗体反应,建立标准曲线,并验证该方法的准确性和精密度.结果 优化后的b型流感嗜血杆菌多糖-酪胺包被浓度为1∶400倍稀释,抗多糖血清稀释度为1∶40K.检测线性范围6.25μg/ml～100μg/ml,最低检测限为3.13μg/ml,回归方程为B/B0=-34.328[PRP]+105.03,线性相关系数为R2 =0.995.批内精密度为3.4％～6.5％,批间精密度为8.48％,测定培养基中b型流感嗜血杆菌多糖的回收率为95.7％.结论 本研究建立的b型流感嗜血杆菌多糖竞争ELISA方法准确性和精密性均较好,可以特异性地检测b型流感嗜血杆菌多糖浓度.

Competitive ELISA Method for Determining Haemophilus Influenza Type b Polysaccharide