去松果体大鼠学习能力、大脑皮质胆碱能纤维及一氧化氮合酶的变化

目的:探讨松果体功能减退对大鼠学习能力、大脑皮质胆碱能纤维分布以及一氧化氮合酶表达影响。方法:实验于1997-07/2000-06在珠江医院神经内科实验室完成。选择经Y型迷宫测试学习正常的雄性SD大鼠12只,随机分两组,实验组6只,行松果体摘除术,对照组6只行假手术。①学习能力测试:大鼠学习能力测试用三等分Y型迷宫进行,以大鼠学习尝试次数表示。②采用酶组织化学法测乙酰胆碱酯酶表达,采用SABC法检测神经元型一氧化氮合酶表达。③乙酰胆碱酯酶纤维定量分析:采用LeicaDiaplan显微镜及LeicaQuantimet500 图像分析仪,测量单位面积内乙酰胆碱酯酶的密度,定量参数为每374693.656μm2内乙酰胆碱酯酶纤维覆盖面积(μm2)。运动皮质,体感皮质测量第Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ层,海马为CA1,CA2,CA3区的辐状层、腔隙层、分子层和齿状回多形细胞层。皮质神经元型一氧化氮合酶表达以每只大鼠随机取相同部位的3张切片,共计6张切片,光镜下分别随机选右侧皮质、内侧隔核-斜角带核、纹状体、海马区各部位相邻4个视野(×400),统计神经元型一氧化氮合酶阳性细胞数。结果:纳入动物12只,均进入结果分析。①大鼠学习能力测试:术前实验组大鼠学习能力(14.67±4.97)次,与对照组(14.33±4.32)次基本一致(P>0.05),松果体摘除40d后大鼠学习能力(28.67±2.42)次,比术前自身对照及术后对照组(13.83±8.33)次明显下降(P<0.01)。②大鼠大脑皮质中乙酰胆碱酯酶纤维密度测定结果:实验组各部位均比对照组明显降低实验组运动皮质、体感皮质、海马CA1,CA2,CA3区和齿状回多形细胞层纤维密度分别为(15244±1339),(14764±1391),(12991±970),(15077±1020),(19546±1489),(19337±1378)μm2,对照组分别为(21001±1021),(17930±2225),(17260±1342),(18911±1048),(24108±1671),(22917±1909)μm2,P<0.01]。③不同脑区神经元型一氧化氮合酶表达:实验组大鼠大脑皮质含有较多神经元型一氧化氮合酶阳性细胞数,细胞数为(5.90±0.68)个,并以体感皮质稍多于运动皮质,多于对照组(3.68±0.39)个(P<0.05);隔核-斜角带核部神经元型一氧化氮合酶阳性细胞数(16.21±2.03)个,明显多于对照组(9.32±1.05)个(P<0.01);海马部神经元型一氧化氮合酶阳性细胞数(4.27±0.75)个、纹状体区(9.35±2.58)个,与对照组(3.94±0.53)个和(8.96±2.31)个相比差异无显著性(P>0.05)。结论:大鼠松果体摘除可以引起大鼠学习能力障碍,其原因可能与大脑皮质、隔核-斜角带核神经元型一氧化氮合酶过度表达,引起一氧化氮神经毒性致胆碱能神经元受损伤有关。

Changes of learning abilities, cholinergic fibers and nitric oxide synthase in cerebral cortex of pinealectomized rats