| 重组人可溶性B淋巴细胞激活因子的制备及活性分析 |
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| 引用本文： | 陈麟凤,何凤田,李蓉芬,钟小林,张艳,高会广,吉清. 重组人可溶性B淋巴细胞激活因子的制备及活性分析[J]. 医学分子生物学杂志, 2004, 1(5): 274-278 |
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| 作者姓名： | 陈麟凤 何凤田 李蓉芬 钟小林 张艳 高会广 吉清 |
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| 作者单位： | 第三军医大学生物化学与分子生物学教研室,重庆市,400038;第三军医大学生物化学与分子生物学教研室,重庆市,400038;第三军医大学生物化学与分子生物学教研室,重庆市,400038;第三军医大学生物化学与分子生物学教研室,重庆市,400038;第三军医大学生物化学与分子生物学教研室,重庆市,400038;第三军医大学生物化学与分子生物学教研室,重庆市,400038;第三军医大学生物化学与分子生物学教研室,重庆市,400038 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(No.30370319,30271228) |
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| 摘 要： | 目的 制备具有功能活性的人TNF家族的B细胞激活因子 (BcellactivatingfactortotheTNFfamily ,BAFF)胞外区 134～ 2 85氨基酸残基段 ,为BAFF的深入研究创造条件。方法 提取人新鲜扁桃体组织总RNA ,经RT PCR扩增编码人BAFF胞外区 134～ 2 85氨基酸残基cDNA ,经序列测定后 ,构建于原核表达载体 pQE 80L并转化大肠杆菌DH5α ,经IPTG诱导表达及Ni2 NTA柱层析纯化目的蛋白 ,行SDS PAGE和Western印迹检测。最后经MTT法检测其增殖活性。结果 RT PCR扩增得到了 4 5 9bp的cDNA片段 ,序列分析与GenBank中报道的编码人BAFF13 4 2 85的cDNA序列一致 ,SDS PAGE及Western印迹证实表达蛋白确实为 6×His BAFF13 4 2 85融合蛋白并存在于包涵体中。活性检测证实其能明显刺激肿瘤细胞的增殖。结论 利用大肠杆菌可高效表达rhBAFF13 4 2 85,得到的纯化蛋白具有较高的生物学活性 ,为进一步的研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | TNF家族的B细胞激活因子(BAFF) cDNA克隆 原核表达 淋巴细胞活化 |
| 修稿时间： | 2004-05-14 |
Preparation and Activity Analysis of Human BAFF |
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| CHEN Linfeng,HE Fengtian,LI Rongfen,ZHONG Xiaolin,ZHANG Yan,GAO Huiguang,JI Qing. Preparation and Activity Analysis of Human BAFF[J]. Journal of Medical Molecular Biology, 2004, 1(5): 274-278 |
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| Authors: | CHEN Linfeng HE Fengtian LI Rongfen ZHONG Xiaolin ZHANG Yan GAO Huiguang JI Qing |
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| Affiliation: | CHEN Linfeng,HE Fengtian,LI Rongfen,ZHONG Xiaolin,ZHANG Yan,GAO Huiguang,JI Qing Department of Biochemistry and Molecular Biology,the Third Military Medical University,Chongqing 400038,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | B cell activating factor to the TNF family (BAFF) cDNA cloning protocaryon expression activation of lymphocytes |
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