5’-核苷酸酶活性的测定

在肝胆疾患特别是胆道阻塞时,5’—核苷酸酶(5’-NT)活性升高,与硷性磷酸酶(ALP)活性呈显著相关。5’—NT活性可为Mg~(2 )激活,为Ni~(2 )所抑制,其最适pH为7.8。作者用—磷酸腺苷(AMP)为底物,测定酶反应产物无机磷的量来表示酶活性,进行了方法学和临床应用的研究。〔方法〕取试管两支,一支测5’—NT和ALP的活性,另一支加Ni~(2 )只测ALP活性(因ALP也能水解AMP),两管之差即为5’-NT的活性。标准管加浓度为50mg/L的无机磷标准液0.1ml,每管各加含有7mM AMP的巴比妥缓冲液(pH7.7)1ml及0.5M MgCl_2溶液0.1ml,向测ALP管中再加0.2M