| 白细胞介素18受体α与β真核表达载体构建及白细胞介素18受体β稳定表达细胞株的建立 |
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| 引用本文： | 陈燕,赵振东.白细胞介素18受体α与β真核表达载体构建及白细胞介素18受体β稳定表达细胞株的建立[J].中国组织工程研究与临床康复,2008,12(28):5482-5485. |
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| 作者姓名： | 陈燕 赵振东 |
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| 作者单位： | 北京大学医学部基础医学院免疫系,北京市,100083 |
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| 摘 要： | 目的：构建人白细胞介素18受体iL-18Rα，β真核表达载体pcDNA3．1-zeocin／IL-18Rα pcDNA3．0／IL-18Rβ，并将pcDNA3．0／IL-18Rβ稳定转染293细胞，构建IL-18Rβ稳定表达细胞株，用于建立IL—18信号转导的体外细胞模型。
方法：实验于2006—06／2007-05在北京大学医学部免疫系实验室完成。扩增并克隆人IL-18Rα和IL-18R β cDNA，构建真核表达载体pcDNA3．1-zeocin／IL-18Rα，pcDNA3．0／IL-18Rβ。将pcDNA3．0／IL-18Rβ转染293细胞，经G418筛选建立起稳定表达IL-18Rβ的细胞株，Western—blot方法检测稳定细胞株IL-18Rβ的表达，挑选表达较高的细胞转染IL-18Rα，通过NF-κB依赖的Luciferase检测IL-18信号转导通路的建立。
结果：成功构建了IL-18Rα和IL-18Rβ的真核表达载体，IL—18Rβ的基因稳定转染到了293细胞中并获得了表达，通过瞬时转染IL-18Rα真核表达载体，在293细胞中建立了IL-18信号转导的体外细胞模型。
结论：成功建立起了IL-18诱导NF-κB活化的体外细胞模型，为进一步研究IL-18信号转导途径奠定了基础。
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| 关 键 词： | IL-18Rα IL—18Rβ 293细胞 稳定细胞株 信号转导 |
Construction of eukaryotic expression plasmid carrying interleukin-18 receptor alpha, beta and establishment of cell line stably expressing interleukin-18 receptor beta |
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| Chen Yan,Zhao Zhen-dong.Construction of eukaryotic expression plasmid carrying interleukin-18 receptor alpha, beta and establishment of cell line stably expressing interleukin-18 receptor beta[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2008,12(28):5482-5485. |
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| Authors: | Chen Yan Zhao Zhen-dong |
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