Mechanism of long-chain noncoding RNA PCGEM1 in the regulation of the invasion and metastasis of oral squamous carcinoma cells via transforming growth factor β2/Smad2 signaling pathway

目的 探讨长链非编码RNA（lncRNA）PCGEM1通过转化生长因子β2（TGF β2）/Smad2信号通路调控口腔鳞状细胞癌（OSCC）侵袭和转移的机制。方法 将60例OSCC患者癌组织及距离癌组织超过2 cm处的正常组织纳入研究,实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-148a、lncRNA PCGEM1在OSCC组织及正常组织、人正常口腔黏膜上皮细胞（OMEC）及人源OSCC细胞株KB、BcaCD885、SCC-4、CAL27、SCC-15中的表达情况;分析lncRNA PCGEM1和miR-148a表达与患者临床病理信息之间的关系。构建lncRNA PCGEM1沉默细胞系KB-siPCGEM1及阴性对照（KB-NC）,并以KB作为空白对照组,采用MTT、Transwell和划痕实验检测lncRNA PCGEM1对KB细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响;使用生物信息学网站starBase预测lncRNA PCGEM1可以互补结合的微小RNA（miRNA）,再根据www.microRNA.org网站预测相应miRNA可靶向结合的基因;免疫印迹（Western blotting）检测TGF β2/Smad2信号通路蛋白表达情况。结果 qRT-PCR结果显示,OSCC组织中lncRNA PCGEM1、miR-148a的表达水平高于正常组织（P<0.05）;lncRNA PCGEM1和miR-148a在不同TNM分期、淋巴结转移和组织分化程度的患者癌组织中表达差异均有统计学意义（P<0.05）;与空白对照组和KB-NC组相比,KB-siPCGEM1组细胞OD_{492 nm}值下降,细胞侵袭数量及迁移率降低,差异均具有统计学意义（P<0.05）;生物信息学预测结果显示,lncRNA PCGEM1可与miR-148a互补结合,miR-148a与TGFβ2存在靶向结合位点;qRT-PCR和Western blotting检测结果显示,KB-siPCGEM1组中miR148a、TGFβ2及p-Smad 2的表达明显低于空白对照组与KB-NC组（P<0.05）,空白对照组和KB-NC组的差异无统计学意义（P>0.05）。结论 lncRNA PCGEM1在OSCC中高表达,高表达lncRNA PCGEM1可能通过上调miR-148a水平,强化TGF β2/Smad2信号通路,从而促进OSCC的进展。