炎症因子IL-1β和TNF-α可通过骨髓间充质干细胞降低多西环素对骨髓瘤细胞株H929的细胞毒性作用

目的：骨髓来源的间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）在骨髓微环境中参与骨髓瘤细胞的耐药性。本实验旨在通过体外实验，研究炎症因子处理的骨髓间充质干细胞在与骨髓瘤细胞株H929共培养条件下，是否影响多西环素（Doxycycline，DOX）对人骨髓瘤细胞株的细胞毒性作用，并初步探讨其可能的作用机制。方法：分别采用CCK8法和流式细胞术（FCM），检测肿瘤坏死因子（TNF）-ɑ或白细胞介素（IL）-1β预处理的人骨髓MSC，与H929细胞共培养过程中，DOX对H929细胞增殖和凋亡的影响；采用FCM和实时聚合酶链反应（RT-PCR）法检测IL-1β或TNF-α处理后，骨髓MSC的血管细胞粘附因子VCAM-1表达；Western Blot方法用于检测在DOX存在时，不同处理的骨髓MSC作为共培养饲养层细胞的条件下，H929细胞经DOX药物处理后p-Erk1/2变化。结果：DOX可抑制骨髓瘤细胞株H929的增殖并诱导其凋亡。人骨髓MSC与H929共培养可以减少DOX对H929的细胞毒性作用，而经IL-1β或TNF-α预处理的人骨髓MSC再与H929共培养，则可以进一步降低DOX的细胞毒性作用。人骨髓MSC经IL-1β或TNF-α处理后，其VCAM-1的mRNA转录水平和细胞表面蛋白表达水平均升高。经炎症因子预处理的骨髓MSC与H929共培养后，可以降低DOX对骨髓瘤细胞株p-Erk1/2的下调作用。结论：DOX在体外对骨髓瘤细胞株表现出剂量和时间依赖性的细胞毒性作用；而炎症因子IL-1β和TNF-α可以通过骨髓MSC来间接拮抗DOX对H929的细胞毒性作用；IL-1β和TNF-α的这一作用的机制可能与上调骨髓MSC的VCAM-1表达与下调p-Erk1/2有关。