重组血小板第4因子在甲醇酵母中的高效表达 |
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作者姓名: | 王昌梅 谢异泓 王同映 杨武剑 李春澍 周金宝 |
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作者单位: | 杭州九源基因工程有限公司, |
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摘 要: | 目的 利用甲醇酵母高效表达重组人血小板第4因子(rhPF4)。方法 用PCR方法扩增出血小板第4因子(PF4)cDNA序列,插入到穿梭质粒pPIC9的MFα信号肽后,在醇氧化脱氢酶1(AOX1)启动子的下游,得到重组质粒pPIC9-PF4,转化到甲醇酵母宿主菌GS115,经筛选得到PF4高表达菌株进行表达,并测定表达产物氨基酸序列和生物学功能。结果 rhPF4氨基酸序列与天然PF4相同,可中和肝素抗凝作用,并呈剂量相关。结论 rhPF4可在甲醇酵母中获得生产规模表达,产物性质和天然的PF4相同。
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关 键 词: | 血小板第四因子 甲醇 酵母 基因表达 聚合酶 链反应 rhPF4 |
修稿时间: | 2000-09-12 |
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