L1型金属β-内酰胺酶的原核表达及特性研究

目的：对临床分离的嗜麦芽窄食单胞菌所产L1型金属β-内酰胺酶基因进行原核表迭，并检测多种β-内酰胺类抗生素对重组L1酶的稳定性。方法：PER扩增L1酶的编码基因，将其亚克隆入pUCm—T载体，测序后将L1基因克隆至表达栽体pET-41a（＋）后在大肠埃希菌BL21（DE3）中表达，分光光度计测定多种β-内酰胺类抗生素对L1型金属β-内酰胺酶的稳定性。结果：本实验中的L1酶与国外同类酶的氨基酸同源性为92．44％。重组L1酶水解青霉素及碳青霉烯类抗生素的能力接近，氨曲南及头孢他啶对L1酶高度稳定。结论：对L1型金属B内酰胺酶的克隆测序及成功表达为进一步研究该酶的分子生物学特性奠定了基础。抗生素对L1酶的稳定性研究为指导临床合理应用抗生素提供了科学的理论依据。