| 腺病毒介导vasostatin-1基因转染表达对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用 |
| |
| 引用本文： | 王铮,肖明第,虞敏,袁忠祥.腺病毒介导vasostatin-1基因转染表达对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用[J].第二军医大学学报,2009,30(5):491-495. |
| |
| 作者姓名： | 王铮 肖明第 虞敏 袁忠祥 |
| |
| 作者单位： | 上海交通大学附属第一人民医院心胸外科,上海,200080 |
| |
| 摘 要： | 目的:构建并鉴定携带人嗜铬粒蛋白A的N端1~76片段(CGA1-76) 即vasostatin-1（VS-1）基因的腺病毒表达载体,观察重组腺病毒在大鼠心肌细胞中的表达,探讨VS-1转基因治疗对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用。方法:（1）利用CGA1-58cDNA模板,设计引物,利用PCR合成、扩增CGA1-76的cDNA并将其克隆到腺病毒穿梭质粒pAdTrack,经PmeⅠ酶切线性化后与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1在大肠埃希菌BJ5183中同源重组。将鉴定正确的同源重组质粒pAd-VS-1线性化后转染QBI-293A细胞进行包装、扩增得到重组腺病毒颗粒Ad-VS-1,将该病毒感染大鼠心肌细胞H9c2并通过蛋白质印迹法检测其表达。（2）建立心肌细胞缺氧/复氧（H/R）损伤模型,分为4组:空白组、H/R组、空载腺病毒转染+H/R组、Ad-VS-1转染+H/R组；测定各组心肌细胞活力,超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量。结果:（1）经PCR、基因测序、酶切鉴定证实重组质粒pAd-VS-1构建成功,将其导入QBI-293A细胞,通过蛋白质印迹法证实病毒颗粒Ad-VS-1感染心肌细胞后VS-1蛋白表达。（2）H/R组心肌细胞活力和SOD含量较空白组明显降低,MDA增加；而VS-1基因转染提高了心肌细胞H/R模型心肌细胞活力和SOD含量，并降低了MDA生成量。结论:成功构建Ad-VS-1,将其感染大鼠心肌细胞后能够表达VS-1并对心肌细胞H/R损伤具有保护作用,其机制和抗氧化作用有关。
|
| 关 键 词： | 基因重组 腺病毒 缺氧/复氧 心肌保护 |
| 收稿时间： | 9/1/2008 12:00:00 AM |
| 修稿时间： | 2/4/2009 12:00:00 AM |
Protective effect of adenovirus-mediated vasostatin-1 gene transfection on rat cardiomyocyte hypoxia/reoxygenation injury |
| |
| WANG Zheng,XIAO Ming-di,YU Min,YUAN Zhong-xiang.Protective effect of adenovirus-mediated vasostatin-1 gene transfection on rat cardiomyocyte hypoxia/reoxygenation injury[J].Academic Journal of Second Military Medical University,2009,30(5):491-495. |
| |
| Authors: | WANG Zheng XIAO Ming-di YU Min YUAN Zhong-xiang |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Vasostatin-1 |
| 本文献已被 万方数据 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《第二军医大学学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《第二军医大学学报》下载免费的PDF全文 |
|
