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人转录因子USF基因在大肠杆菌中的表达、纯化及在FAK启动子中的结合研究
引用本文:李淑锋,华子春. 人转录因子USF基因在大肠杆菌中的表达、纯化及在FAK启动子中的结合研究[J]. 东南大学学报(医学版), 2007, 26(4): 267-270
作者姓名:李淑锋  华子春
作者单位:南京大学,医药生物技术国家重点实验室,江苏,南京,210093;东南大学,基础医学院,江苏,南京,210009;南京大学,医药生物技术国家重点实验室,江苏,南京,210093
摘    要:目的:在大肠杆菌中表达人源转录因子USF(upstream stimulatory factor)并进行分离纯化,进一步分析其在FAK(focal adhesion kinase)启动子中的DNA结合能力。方法:将人源USF cDNA克隆到表达质粒pET28a载体,然后将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达带His6-Tag的融合蛋白His-USF,通过镍柱亲和层析纯化,SDS-PAGE分析鉴定。EM-SA分析纯化后的蛋白与FAK启动子的DNA结合情况。结果:His-USF在大肠杆菌中获得高效表达,镍柱亲和层析纯化得到了高纯度的蛋白,并能够结合到FAK的启动子上。结论:获得高效表达的高纯度His-USF融合蛋白,为USF对其靶基因的结合与转录调控的进一步研究奠定了基础。

关 键 词:USF基因  粘着斑激酶  蛋白表达  转录因子
文章编号:1671-6264(2007)04-0267-04
修稿时间:2006-11-06

Expression, purification of human transcription factor USF and its DNA binding analysis in FAK promoter
LI Shu-feng,HUA Zi-chun. Expression, purification of human transcription factor USF and its DNA binding analysis in FAK promoter[J]. Journal of Southeast Univ: Medical Sci Ed, 2007, 26(4): 267-270
Authors:LI Shu-feng  HUA Zi-chun
Abstract:
Keywords:
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