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| Fas cDNA克隆、表达及重组蛋白纯化的研究 | |
| 引用本文： | 王希良,黄云辉,朱锡华,何蕊,赵一博. Fas cDNA克隆、表达及重组蛋白纯化的研究[J]. 中国免疫学杂志, 2002, 18(1): 40-41,52 |
| 作者姓名： | 王希良 黄云辉 朱锡华 何蕊 赵一博 |
| 作者单位： | 1. 军事医学科学院 2. 第三军医大学免疫学教研室,重庆,400038 3. 第二炮兵总医院 |
| 基金项目： | 全军“九五”医药卫生重点课题，国家自然科学基金课题和重庆市公关课题资助 |
| 摘 要： | 目的:获得高质量及充足的Fas重组蛋白。方法:采用PCR构建表达重组质粒,亲和层析纯化Fas重组蛋白,ELISA检测其免疫学功能。结果:①PCR扩增获得目的片段约 470 bp。②Sanger双脱氧链终止法测序表明,该 DNA序列仅 174位由A→G突变,属于同义突变,与已知的Fas膜外区氨基酸完全一致。③重组质粒经IPTG诱导有一蛋白得以表达,其目的融合蛋白占细菌总蛋白的17. 4%,分子量约为 34．3 kD。④经 Factor Xa切割 Fas融合蛋白,纯化获得 Fas重组蛋白,Western印迹出现特异性Fas蛋白带,分子量为21．3kD,与预测结果相吻合。⑤ELISA检测 Fas重组蛋白,具有抗体的免疫学活性。结论:成功地表达并纯化了Fas重组蛋白,解决了Fas不易获得的难题,为研究Fas提供了良好的实验材料。 |
| 关 键 词： | Fas 重组蛋白 细胞凋亡 |
| 文章编号： | 1000-484X(2002)01-0040-02 |
Cloning and expression of human Fas cDNA in E.coli and purification of rhFas protein |
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| WANG Xi-Liang,HUANG Yun-Hui,ZHU Xi-Hua et al. Cloning and expression of human Fas cDNA in E.coli and purification of rhFas protein[J]. Chinese Journal of Immunology, 2002, 18(1): 40-41,52 | |
| Authors: | WANG Xi-Liang HUANG Yun-Hui ZHU Xi-Hua et al |
| Affiliation: | WANG Xi-Liang,HUANG Yun-Hui,ZHU Xi-Hua et al. Department of Immunology,the Third Military Medical UNiversity,Chongqing 400038 |
| Abstract: | |
| Keywords: | Fas Recombinant protein Apoptosis |
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